Kütikül Bozulması: Drosophila Larvalarından Hemolenf Toplamak İçin Bir Yöntem

JoVE Encyclopedia of Experiments

Biyoloji

0 görüntüleme • 2:01 dk • April 30th, 2023

- Başlamak için, temiz bir diseksiyon pedine bir damla tampon pipetleyin. Ardından, damlacık üzerine kurutulmuş bir canlı larva yerleştirin. Drosophila, diğer eklembacaklılar gibi, kalbin vücudun etrafına hemolenf pompaladığı ve iç organları yıkadığı açık bir dolaşım sistemine sahiptir. Eklembacaklıların birleşik kanı ve interstisyel sıvısı olan hemolenfi serbest bırakmak için forseps kullanın ve larvaların yarı sert dış kaplaması olan kütikülü açın.

Daha sonra, karkası atın ve hemolenf çözeltisini diseksiyon plakasından bir mikrosantrifüj tüpünde soğutulmuş tampon çözeltisine aktarın. Son olarak, toplanan hemolenfteki hücreler olan hemositlerin sayısını saymak için bir hemositometre kullanın. Bu protokolde Drosophila melanogaster larvalarından hemolenf toplayacağız.

- Bir mikrosantrifüj tüpüne 10 mikrolitre 1x PBS ekleyerek ve tüpü buz üzerine yerleştirerek hemolenf toplamaya başlayın. Ardından, temiz bir diseksiyon pedine 10 mikrolitrelik bir damla 1x PBS yerleştirin. Tek bir larva seçin ve bir mendil üzerine koyarak kurulayın. Ardından diseksiyon pedi üzerindeki PBS damlacığına aktarın.

Forseps kullanarak, hemolenfleri serbest bırakmak için kütikülü nazikçe yırtın ve ters çevirin ve ardından karkası atın. Bir pipet ile hemolenfleri diseksiyon pedinden toplayın. Hemolenfleri buzlu PBS mikrosantrifüj tüpüne ekleyin ve yukarı ve aşağı pipetleyerek karıştırın. 10 mikrolitre numuneyi bir hemositometre odasına yükleyin ve bir konsantrasyon okuması yapın.

08:35

Uygulamalarda Canlı Görüntüleme Drosophila melanogaster Embriyonik Hemocyte Göçler

İlgili videolar

0 Görüntüler

08:54

Hemocytes mikrobiyal enfeksiyon ve çözümleme çekme--dan Drosophila melanogaster larva

İlgili videolar

0 Görüntüler

05:50

Bir In Vivo fagositoz tahlil kullanarak Drosophila melanogaster, meyve sineği hücresel bağışıklık yanıtı değerlendirirken

İlgili videolar

0 Görüntüler

05:52

İnsülin Enjeksiyon ve Yetişkin İnsülin Hassasiyet Tedbir hemolimf Ekstraksiyon Drosophila melanogaster

İlgili videolar

0 Görüntüler

04:20

Larva Lenf Bezi Diseksiyonu: Drosophila Hemosit Üreten Organın İzole Edilmesi

İlgili videolar

0 Görüntüler

03:56

Drosophila Geç Pupa İndirekt Uçuş Kası (IFM) Diseksiyonu: Yüksek Verimli Doku Toplama Yöntemi

İlgili videolar

0 Görüntüler

02:19

Hemositin hematopoietik ceplere yeniden yapışmasını değerlendirmek için bir Hemosit bozukluğu testi

İlgili videolar

0 Görüntüler

11:15

Ve tahlil Kan Hücresi popülasyonlar

İlgili videolar

0 Görüntüler

11:49

Yöntemler Lenf Bezi ve Hemocytes içinde incelemek için

İlgili videolar

0 Görüntüler

05:37

Drosophila Larvalarında Oenositlerin Diseksiyonu ve Lipid Damlacık Boyaması

İlgili videolar

0 Görüntüler

Son güncelleme: 29 Ağustos 2026