Sinek Pupalarından Göz-Beyin Kompleksinin Diseksiyonu: Retina Dokusunu İzole Etmek İçin Bir Yöntem

- Başlamak için, bir meyve sineği pupa sırtını veya sırtını, tarafı yukarı bakacak şekilde sabitleyin. Hayvanın başını ortaya çıkarmak için operkulumu veya pupa'nın ön ucunu çıkarın. Muhafazayı kesip soyarak pupayı açmaya devam edin. Serbest bırakıldıktan sonra, kurumasını önlemek için disseke edilmiş pupayı PBS ile örtün. Göğüs kafesinden temiz, kesitsel bir kesi yapın ve karkasın arka kısmını çıkarın.

Optik loblara bağlı iki retinayı içeren göz-beyin kompleksini ortaya çıkarmak için, göğüs kafesinin kesik açık kenarından epiteli yırtmaya başlayın ve kafa kapsülünü kademeli olarak açmaya devam edin. Ardından, göz-beyin kompleksini dikkatlice kafa kapsülünün kalıntılarından uzaklaştırın.

Örnek protokolde, çeşitli aşağı akış analizleri için dokuyu izole etmek için kullanılan bir pupa göz-beyin diseksiyonunun bir gösterimini göreceğiz.

- Drosophila pupasını siyah bir diseksiyon kabına yerleştirdikten sonra, diseksiyon kabının üzerine pupadan uzağa yeni bir parça çift taraflı bant koyun ve pupa sırt tarafını dikkatlice bandın üzerine yerleştirmek için bir çift forseps kullanın.

Çanağı stereo mikroskop altına yerleştirin ve her pupanın operkulumunu çıkarmak için forseps kullanın. Her b