JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyoloji
0 görüntülenme • 2:56 dk. • April 30th, 2023
- Yıkanmış C. elegans'ı sıvı içinde, solucan tırnak etlerinin cam yüzeye yapışmasına yardımcı olacak bir bileşik olan poli-lizin ile kaplanmış bir cam slayt üzerine aktarın. Bir kenarı alt sürgüden sarkan başka bir cam sürgüyü düz bir şekilde aşağı doğru hafifçe bastırın. Solucanları zarar vermeden hareketsiz hale getirmek için, herhangi bir yanal hareketten kaçınarak hayvanları sıkıştırın. Ardından, sıvı nitrojen veya kuru buz gibi bir dondurma maddesi ile doldurulmuş yalıtılmış bir laboratuvar kabının içindeki metal bir blok üzerine sıkıştırılmış solucanlı cam slaytları yerleştirin.
Metal, blok yüzeyinin, solucanın tırnak etlerini her iki cam yüzeye hızlı bir şekilde dondurmak için yeterince soğuk olmasını sağlayan etkili bir sıcaklık iletkenidir. Dondurulduktan sonra, solucan tırnak etlerini ayırmak veya açmak için cam kızakları hızla ayırın. Düşük geçirgenliğe sahip kütikülün bozulması kimyasal fiksatiflerin ve boyama antikorlarının iç solucan dokularına erişmesine izin verdiğinden, doku fiksasyonu ve boyamaya devam edin. Aşağıdaki protokolde, dondurarak parçalama tekniğinin ve doku fiksasyonunun ayrıntılı bir gösterimini göreceğiz.
- İlk olarak, solucanları düzeltmek için bir
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin