JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyoloji
0 görüntülenme • 2:59 dk. • April 30th, 2023
- M9 tamponu içeren bir tüpte, istenen gelişim aşamasında 150'ye kadar hermafrodit solucanı toplayın. M9 tamponu ile yıkayarak ve numuneyi santrifüjleyerek solucanlardan bakterileri çıkarın.
Numune kaybını önlemek için süpernatanı çıkarırken tüpü diseksiyon mikroskobu altında görüntüleyin. Solucanları minimum hacimde M9 tamponu olan bir cam kaba aktarın. Solucanları uyuşturmak için levamisol ekleyin.
Solucanın başını ve iki ampul şeklinde yapı içeren farenksi veya ön bağırsağı bulun. Farenksin arkasındaki solucanı kesmek için iki iğne kullandı. Dokuyu etkilememek için diseksiyonu hızlı bir şekilde tamamladığınızdan emin olun.
Kütikül bozulduğunda, solucanın iç basıncı nedeniyle iki gonad kolu ekstrüde edilir veya vücuttan dışarı itilir.
Bu örnekte, immünofloresan analizi için yetişkin solucanlardan gonadları inceleyeceğiz.
- İstenilen gelişim aşamasında 100 ila 150 solucan seçin ve bunları 100 mikrolitre M9 tamponu içeren 1,5 mililitrelik bir mikrosantrifüj tüpünde toplayın. Daha sonra, mikrosantrifüj tüpünü 900 mikrolitre daha fazla M9 tamponu ile doldurun ve oda sıcaklığında 1 dakika boyunca 1.000 kez g'de santrifüjleyin.
Diseksiyon mikroskobu altında, M9 tamponunun 900 mikrolitr
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin