JoVE Encyclopedia of Experiments
Biyoloji
0 görüntüleme • 2:09 dk • April 30th, 2023
- İlk olarak, bantlı diğer iki slayt arasına bir mikroskop lamı yerleştirin. Bunlar, agaroz ped hazırlığı için destek ve ara parçalar sağlar. Ardından, slaydın üzerine bir damla eritilmiş agaroz yerleştirin. Hemen başka bir slaytla üzerine bastırın.
Agaroz katılaştıktan sonra, slaytları dikkatlice ayırın, böylece agaroz bir slaytta kalır. Kurumuş pedler hayvanları kurutabileceğinden, her zaman yeni yapılmış pedler kullanın. Ped bütünlüğünü bozabilecek çatlak veya kabarcık olmadığından emin olun.
Daha sonra, ped merkezine bir damla anestezik ekleyin ve 10 ila 15 hayvanı ona aktarın ve yanlarında mümkün olduğunca az bakteri getirin. Fazla bakteri görüntülemeyi etkileyebilir. Anestezik solüsyon kurursa, hayvanların üzerine ikinci bir damla ekleyin.
Pedin üzerine nazikçe bir lamel yerleştirin. Hayvanlara zarar vermemek için baloncuk oluşturmaktan veya üzerine çok fazla baskı uygulamaktan kaçının. Son olarak, görüntüleme için hazır olan slaydı etiketleyin.
- Görüntüleme için slaytlar hazırlayarak başlayın. Bir mikroskop lamına bir damla eritilmiş agaroz koyun ve hemen başka bir mikroskop lamı ile damlacığı aşağı bastırın, agarozu hafifçe düzleştirin Agarozun bir dakika kuruması gerekir.
Ardından, iki slaytı dikkatlice ayırın ve katılaşmış pedi slaytlardan birinin üzerinde bırakın. Slaytı mikroskop tablasına yerleştirin ve agras pedinin ortasına 5 ila 10 mikrolitrelik bir anestezik damlası ekleyin.
Çözelti kurumadan önce 10 ila 15 hayvanı stok plakasından anestezik damlacığa hızlı bir şekilde aktarmak için ısıyla sterilize edilmiş bir kazma kullanın. Ardından, agaroz pedinin hemen üzerine yerleştirerek ve yavaşça aşağı bırakarak bir lamel uygulayın.
Bu makale, küçük hayvanların görüntülenmesi için agaroz pedlerin hazırlanmasını özetlemektedir. İşlem; bir mikroskop lamı üzerinde katılaşmış bir agaroz tabakası oluşturmayı, anestetik uygulamayı ve hayvanların gözlem için dikkatlice yerleştirilmesini içerir.
Erken aşama hedef doğrulamada ve fenotipik taramalarda, canlı görüntüleme sırasında organizma bütünlüğünün korunması, doğru fenotipik okumalar için kritiktir. Bu yöntem, C. elegans tabanlı analizler için tekrarlanabilir örnek hazırlığını destekleyerek hücresel ve organel morfolojisi ölçümlerindeki değişkenliği azaltır. Standartlaştırılmış montaja olanak sağlayarak, preklinik keşif iş akışlarında veri güvenilirliğini artırır.
Bu yöntem, C. elegans modellerinde güvenilir fenotipik tarama yoluyla hedef doğrulamayı destekleyerek erken keşif sürekliliğine uyum sağlar.
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
Son güncelleme: 22 Ağustos 2026