Drosophila Saldırganlık Testi: Sineklerde Davranışsal Plastisiteyi Test Etmek İçin Bir Yöntem

0 görüntülenme3:13 dk. • April 30th, 2023

- Sineklerde saldırganlığı değerlendirmek için, iki giriş noktası ile donatılmış kapalı bir dövüş odası ve denemeden önce denekleri ayrı tutmak için bir bölücü kullanın. Sinekler için çatışma yaratmak için odanın ortasına bir besin kaynağı yerleştirin. Ardından, önceden izole edilmiş ve işaretlenmiş erkekleri arenanın her iki tarafındaki giriş noktalarından yükleyin. Ayırıcıyı çıkarın ve saldırganlığı ölçmek için sineklerin karşılaşmalarını kaydedin.

Hakimiyet kurmak için, bir erkek, rakibe yaklaşmak ve onu kovalamaktan, saldıran sineğin arka ayakları üzerinde yükseldiği ve onu yakalamak için rakibin üzerine düştüğü saldırganlığı gösteren bir davranış olan akciğere kadar yoğunluğu artan basmakalıp saldırgan davranışlar sergiler. Buna karşılık, rakip, saldırganın geri çekilmesi için kaçmak gibi savunma davranışları sergiler. Böylece kavgadan bir kaybeden ve bir kazanan çıkar ve her rakipte bir yenilgi veya zafer anısı oluşur.

Örnek protokolde, saldırganlık tahlili sırasında hayvan kullanımını ortadan kaldıran bir kurulumun, ilk kavgalarını kaybeden sineklerde hafıza oluşumunu incelemek için "kaybeden" etkisi olarak nasıl kullanıldığını göreceğiz.

- Her dövüş odasına plastik bölücüler yerleştirerek davranışsal deneylere başlayın. Pamuklu tapayı izolasyon tüpünden çıkarın ve tüpü cihazın yan tarafındaki açık bir deliğin altına yerleştirin. Sineğin negatif jeotaksiler ile dövüş odasına girmesine izin verin. Ardından, sinek odaya girdikten sonra kayar duvarı kapatın. İkinci sineği aparatın diğer tarafındaki dövüş odasına sokmak için prosedürü tekrarlayın.

Ardından, cihazı aydınlatmalı video kayıt konumuna geri yerleştirin. Video kaydına başlayın ve sineklerin etkileşime girmesine izin vermek için plastik bölücüyü çıkarın. "Kaybeden" etkisi deneyleri için, güçlü baskınlık ilişkilerinin oluşmasını sağlamak için ilk dövüşleri 20 dakika boyunca kaydedin. 20 dakika sonra, sinekleri ayırmak ve videoyu durdurmak için plastik bölücüyü yavaşça dövüş odalarına yerleştirin.

- Güçlü bir "kaybeden" zihniyetini teşvik etmek için, ilk kavgalar sırasında sineklerin baskınlık ilişkisi kurduğundan ve sürdürdüğünden emin olun ve ardından sinekleri ayırmak için bölücüleri yerleştirirken hayvanların rahatsızlığını en aza indirin.

- 10 dakikalık bir dinlenme süresinden sonra kayda başlayın ve plastik ayırıcıyı yavaşça çıkarın. Sinekleri 20 dakika daha etkileşime bırakın. 20 dakika sonra kaydı durdurun. Deneyi sonuçlandırmak için, daha önce açıklanan prosedürü tersine çevirerek sinekleri negatif jeotaksi ile davranış odalarından çıkarın.