Yetişkin Bir Sinekten Midgut Diseksiyonu: Sindirim Sistemini İzole Etmek İçin Bir Yöntem
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyoloji
0 görüntülenme • 3:06 dk. • April 30th, 2023
- Başlamak için, anestezi uygulanmış bir yetişkin sineğin kafasını çıkarın. Kurumasını önlemek için başı kesilmiş sineği Fosfat Tamponlu Salin veya PBS ve Sığır Serum Albümini veya BSA içeren bir çözelti ile örtün. Sineği forseps ile göğüs kafesinden tutun ve ardından bağırsakları açığa çıkarmak için karnı ikinci bir forseps çifti ile çekin. Mahsul veya yiyecek saklama çuvalı göğüs kafesine bağlanacağından, bağırsağı göğüs kafesinden nazikçe çekin.
Ayrıldıktan sonra, bağırsağı açmak için mahsulü karından uzaklaştırın. Bağırsakları karın boşluğundan kurtarmaya başlamak için sineğin arka ucunu çekin. Tüm dokuyu karın bölgesinden çıkarmak için bağırsağı çekmeye devam edin. Serbest bırakıldıktan sonra, ön bağırsağı, Malpighian tübüllerini, arka bağırsağı ve yumurtalıkları çıkarın, böylece sinek içindeki birincil sindirim bölgesi olan disseke edilmiş orta bağırsağı geride bırakın.
Örnek protokolde, Floresanla Aktive Edilmiş Hücre Sıralama veya FACS yoluyla daha fazla analiz edilmek üzere genç ve yaşlı yetişkin sineklerin orta bağırsaklarını inceleyeceğiz.
- Diseksiyona başlamadan önce, standart bir sinek yatağında karbondioksit ile 40 sinek şişesini uyuşturun. Daha sonra tüm sineklerin
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin