JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyoloji
0 görüntülenme • 2:40 dk. • April 30th, 2023
- Bir dişi sineğin yumurtlama veya yumurtlama bölgeleri tercihini test etmek için, tek bir dişi sineğe yumurtalarını bir test odasına bırakacağı iki farklı alt tabaka arasında bir seçim yapın. Sinek, mevcut seçenekleri karşılaştıracak ve tercih ettiği siteleri, genellikle yavruları için en uygun alt tabakayı seçecektir.
Sineğin birçok yumurta bırakmak için hazırlandığından emin olun, böylece her denemede sağlam yumurta sayıları vardır. Deneyin sonunda, sineği çıkarın ve sineğin yumurtlama tercihini belirlemek için her bir alt tabakadaki yumurtaları sayın.
Örnek protokolde, düz veya sükroz içeren agaroz substratları için yumurtlama tercihini test etmek için yüksek verimli bir test kullanacağız.
- Önceden yapılmış akrilik yumurtlama odaları elde ederek deneye devam edin. Alt yüzey olarak işlev görmesi için haznenin bir parçasını yükleyerek plastik tabakaları üste yerleştirin.
Daha sonra, dişileri bir karbondioksit pedi üzerinde uyuşturun ve her bir yumurtlama alanına ayrı ayrı yükleyin. Sineklerin karbondioksitten kurtulmaları ve yeni ortama alışmaları için 30 dakika izin verin. Sinekler ayarlanırken, bir tüpü 10 mililitre işaretine kadar agaroz ile doldurun. Ardından, tüpe 750 mikrolitre 2 molar sükroz çözeltisi yerleştirerek 150 milimolar sükroz substratı hazırlayın. Bir şişe eritilmiş% 1 agarozu su banyosunda saklayın.
Düz alt tabakayı da aynı şekilde hazırlayın, ancak sükroz çözeltisini damıtılmış su ile değiştirin. Daha sonra, haznenin alt tabaka parçasını alın ve her bir oluğa 1.000 mikrolitre agaroz alt tabakasını pipetleyin. Agarozu 30 dakika katılaşması için bir kenara koyun.
Agaroz substratları ve sinekler hazır olduğunda, yumurtlama odasının üç parçasını da birleştirin ve ardından plastik tabakaları çıkarın. Odaları gece boyunca sinek kuluçka makinelerine yerleştirin.
Odaya karbondioksit enjekte ederek kadınları uyuşturun. Odayı sökün ve anestezi uygulanmış sinekleri atın. Son olarak, kayıt tutmak için yumurtaların fotoğraflarını çekin.