C. elegans Hayatta Kalma Testi: Kısa Süreli Bir Toksisite Testi

- Toksisite açısından test edilecek bileşiği hazırlayarak başlayın ve bir tahlil plakasının kuyucuklarına dağıtın. Uygun gelişim aşamasındaki solucanları her bir kuyucuğa aktarın ve hemen bir zamanlayıcı başlatın. Hasar görmüş solucanları not edin ve bunları hayatta kalma hesaplamalarınıza dahil etmeyin.

Önceden belirlenmiş bir süre sonra, her bir kuyucukta hala canlı olan solucanların sayısını sayın. Bir diseksiyon mikroskobunun parlak ışığı veya plakaya hafifçe vurmak, herhangi bir canlı solucanın hareket etmesine neden olmalıdır. Bu gözlemi her zaman aralığından sonra, hayvanların çoğu ölene kadar tekrarlayın. Aşağıdaki protokolde, oksidatif stresi indükleyen bir bileşik olan paraquat'a maruz kalma sırasında L4 larvalarının hayatta kalma süresini gözlemleyeceğiz.

- Bu gösteride, paraquat kullanılarak oksidatif stres indüklenecektir. Ekteki protokol metninde açıklandığı gibi taze bir 100 milimolar parakuat çözeltisi hazırlayın. Paraquat tehlikeli ve oldukça toksik bir bileşiktir ve uygun yönergelere göre ele alınmalıdır.

96 oyuklu bir plakanın her kuyucuğuna 40 mikrolitre paraquat solüsyonu pipetleyin. Test edilen her koşulun kopyası olarak en az 12 kuyu kullanın. Bir platin tel