JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyoloji
0 görüntülenme • 2:56 dk. • April 30th, 2023
- C. elegans, kısmen bağırsak bariyerini bozarak geçirgenliğini artırarak hastalığa neden olan bağırsak patojenlerinin neden olduğu deneysel bir enfeksiyon modeli olarak kullanılır. İlgilenilen bir bakteri veya kimyasal bileşiğe maruz kaldıktan sonra bariyer bütünlüğünü ölçmek için, solucanları plakalarından yıkayarak toplayın.
Daha sonra, bu solucanları, floresan etiketli yüksek moleküler ağırlıklı bir polisakkarit olan FITC-dekstran ile karıştırılmış ısıyla öldürülmüş E. coli'den oluşan etiketli yiyeceklerle agar plakalarına yerleştirin.
Solucanların etiketli bakterileri yemesine izin verin. Sağlam bağırsak bariyerlerine sahip olanlar yiyecekleri hızla temizlerken, daha geçirgen bağırsaklara sahip solucanlarda floresan işaretleyici organın lümeninin ötesine nüfuz edecektir.
Hayvanları sabitlemek için solucanları bir formaldehit çözeltisine aktarın. 1 ila 2 dakika sonra formaldehiti montaj ortamıyla değiştirin.
Son olarak, solucanları floresan mikroskobu ile görüntüleyin. C. elegans bağırsak granüllerinin otofloresan olduğunu unutmayın, bu nedenle arka plan sinyali olacaktır. Ancak genel olarak, daha fazla bağırsak floresansı daha yüksek geçirgenliği gösterir.
Örnek protokolde, DI
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin