JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 3:22 dk. • April 30th, 2023
- Başlamak için, insan lösemi hücrelerini taze hazırlanmış bir kültür ortamında tohumlayın ve istenen süre boyunca inkübe edin. İnkübasyondan sonra, bu hücre süspansiyonunun küçük bir miktarını tripan mavisi ile boyayın ve bir TC20 hücre sayaç lamı kullanarak hücre canlılığını değerlendirin. Ölü hücreler geçirgendir ve negatif yüklü boyayı alırken, canlı hücreler geçirimsizdir.
Daha sonra, hücrenin kolesterolünü yeterince tüketmek için kültür şişesine metil beta siklodekstrin ekleyin ve bu da onları ultrasona duyarlı hale getirir. Hücreleri istenen süre boyunca inkübe edin. Hücre sonikasyon sistemini deiyonize su ile doldurun ve vakum kabarcıklarını önlemek için birkaç dakika gazdan arındırın. Sintilasyon şişesinde istenen miktarda hücreyi aktarın ve şişeyi hücre sonikasyon sisteminin tutma cihazına takın.
Tutma cihazını kornanın üzerine yerleştirin ve kornanın üstünden istenen yüksekliği ayarlayın. Hücreleri sonikasyon yapmak için istenen süre boyunca gerekli darbeleri ayarlayın. Hücre süspansiyonuna tripan mavisi ekleyin ve hücre canlılığını ve hasarını analiz etmek için TC20 hücre sayacına yerleştirin. Metil beta siklodekstrin ile tedavi edilen lösemi hücreleri, düşük frekanslı
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin