XTT Testi: Hücre Canlılığını ve Mitokondriyal Aktiviteyi Değerlendirmek için Kolorimetrik Bir Test

- Düşük frekanslı ultrason dalgaları, insan lösemi hücrelerinin seçici lizisine yol açar ve XTT testi bu hasarın derecesini belirlemeye yardımcı olur. Tahlil, sağlıklı hücrelerin mitokondriyal enzimlerinin sarı bir XTT boyasını formazan adı verilen turuncu bir bileşiğe dönüştürmesi prensibine göre çalışır. Tahlillere başlamak için, hücreleri kolesterol tüketen bir ajan olan metil beta-siklodekstrin ile tedavi edin ve ardından hücre hasarını indüklemek için hücreleri düşük güçte sonikleştirin.

Hücreleri peletlemek için santrifüjleyin ve pelete taze hücre büyüme ortamı ekleyin. Hücreleri istenen konsantrasyonda çok kuyulu bir mikroplakaya tohumlayın ve gece boyunca inkübe edin. Şimdi, aktive edilmiş XTT çözeltisini hücrelere ekleyin ve mikroplakanın kuyucuklarında turuncu renk gelişene kadar inkübe edin. Plakayı bir spektrofotometreye yerleştirin. Absorbansı 450 ila 500 nanometrede ve ardından 630 ila 690 nanometrede ölçün. Kesin sonuçlar elde etmek için iki değeri çıkarın. XTT tahlilinde daha yüksek absorbans değeri, mitokondriyal enzimlerin daha yüksek aktivitesini ve daha yüksek hücre canlılığını gösterir.

Aşağıdaki videoda, metil beta siklodekstrin ile tedavi edilen lösemi hücrel