JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 3:44 dk. • April 30th, 2023
- Lösemik hücreler mezenkimal stromal hücrelerle birlikte kültürlendiğinde, stromal hücrelerle etkileşime girerler ve üç alt popülasyon oluştururlar. Serbestçe yüzen askıda hücreler, mezenkimal tek tabakanın yüzeyine yapışan faz parlak hücreler ve mezenkimal tek tabakanın altındaki faz karartma hücreleri. Her bir alt popülasyonu ayırmak için, mezenkimal stromal hücreli tek tabakalı bir doku kültürü plakası alın.
Tümöre özgü kültür ortamında bulunan lösemik hücreleri tek tabaka üzerine tohumlayın ve plakayı istenen süre boyunca inkübe edin. Daha sonra, serbestçe yüzen hücreleri ayrı bir tüpe pipetleyerek tümör hücrelerini süspansiyon halinde toplayın. Şimdi, taze ortamı plakaya ekleyin ve faz parlaklığında tümör hücrelerini mezenkimal tek tabaka yüzeyinden çıkarmak için kuvvetlice pipetleyin.
Bu hücreleri ayrı bir tüpte pipetleyerek toplayın. Yapışan mezenkimal hücreleri çıkarmak için plakaya tripsin ekleyin. Tripsinin etkisini durdurmak ve hücre agregalarını parçalamak için fetal sığır serumu veya FBS ekleyin. Şimdi, faz karartma hücrelerini bir tüpte toplayın. Farklı hücre alt popülasyonları içeren üç tüpü de ayrı ayrı santrifüjleyin ve daha fazla analiz için peleti taze ortamda y
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin