G-10 Kolon Tabanlı Lösemi Hücre Ayıklama: Akut Lenfoblastik Lösemi Hücrelerini Kemik İliği Stromal Hücrelerinden Saflaştırmak İçin Bir Yöntem

0 views • 2:57 min • April 30th, 2023

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

- Başlamak için, hücre ayrışması için kemik iliği stromal hücreleri ile birlikte kültürlenmiş lösemi hücreleri içeren bir plakaya tripsin ekleyin. Hücre canlılığını korumak için önceden ısıtılmış ortam kullanarak peleti santrifüjleyin ve yeniden askıya alın. G-10 sütunu, bir jel matrisi oluşturmak için suda şişen çapraz bağlı dekstran boncuklar içerir.

Boncuklar arasındaki boşluğu doldurmak için G-10 sütununu önceden ısıtılmış ortamla dengeleyin ve ortamın sütundan yavaşça çıkmasını sağlayın. Hava kabarcıklarının oluşmasını önlemek için kolonda uygun bir sıcaklık sağlayın. Hücre karışımını G-10 kolonundaki jel boncukların üzerine yavaşça yükleyin. G-10 kolonundaki hücreleri istenen süre boyunca oda sıcaklığında inkübe edin. Hücre yüzey özelliklerine ve boyutuna bağlı olarak, jel boncuklar tercihen daha büyük kemik iliği stromal hücrelerini kısıtlayarak lösemi hücrelerinin ayrılmasına izin verir.

Sütuna önceden ısıtılmış ortam ekleyin ve lösemi hücrelerinin süspansiyonunu toplayın. Hücre süspansiyonunu santrifüjleyin ve peleti uygun bir tamponda yeniden süspanse edin. Daha fazla analiz için saf lösemi hücresi popülasyonunu kullanın. Aşağıdaki örnekte, G-10 sütununu kullanarak saf bir lösemi hücresi popülasyonunu stromal ko-kültürden ayıracağız.

- Her bir alt popülasyon için musluk tamamen kapalıyken, 1 mililitrelik hücre hacminin tamamını, hazırlanan G-10 sütunlarından birinin üstüne damla damla eklemek için 1000 mikrolitrelik bir pipet kullanın ve hücrelerin G-10 peletinin üstünde veya içinde kaldığından emin olun. Hücrelerin oda sıcaklığında 20 dakika boyunca G-10 peleti üzerinde inkübe etmesine izin verin. Ardından, sütuna 1 ila 3 mililitre taze, önceden ısıtılmış ortam ekleyin ve vanayı, ortamın sütunlardan yavaşça damla damla çıkması için açın.

Sütunlara 1 ila 2 mililitrelik artışlarla önceden ısıtılmış ortam eklemeye devam edin. Toplam 15 ila 20 mililitre lösemik hücre toplandığında, vanayı kapatın ve toplama tüpünü kapatın. Ardından, hücreleri döndürün ve peleti uygun aşağı akış analiz tamponunda yeniden süspanse edin.

07:47

Bir Proteoliposome Tabanlı effluks Deney Cl Tek-molekül Properties belirleme - Kanallar ve Nakliyeciler

Related Videos

0 Views

09:42

Hibridoma teknolojisi ile murin monoklonal antikorlar üretilmesi

Related Videos

0 Views

15:04

PeptiQuick, Aerodinamik Protein Bağlayıcı Tahliller için Biyotinylated Peptidiskler içine Membran Proteinlerin Bir Adım Dahil

Related Videos

0 Views

03:44

Lösemik Alt Popülasyon Hasadı: Lösemik Hücre Alt Popülasyonlarının 2D Ko-kültürden Mekansal Olarak Ayrılması İçin Bir Yöntem

Related Videos

0 Views

03:06

Negatif İmmünomanyetik Seçim: Periferik Kan Mononükleer Hücrelerinden B Hücrelerini Saflaştırmak İçin Bir Yöntem

Related Videos

0 Views

14:06

Kordon Kanı gelen Prekürsör B-hücreli altkümeleri İzolasyonu

Related Videos

0 Views

10:18

Protein fonksiyonu için bir 2DE-Jel Spot: Kronik Lenfositik Lösemide HS1 öğrendim Ders

Related Videos

0 Views

08:01

Fare kemik iliğinden plazmasitoid dendritik hücreleri Saflaştırılması floresans ile aktive edilen hücre sınıflandırma

Related Videos

0 Views

09:57

Örnek ve işlem kemik iliği ölçülebilir artık hastalık ve akut Myeloid lösemi lösemik kök hücre ölçmek için kapsamlı iletişim kuralı

Related Videos

0 Views

09:01

Akış Sitometresi lösemi kök hücre birincil Akut Miyeloid Lösemi ve hasta-türetilen-xenografts, tanı ve takip yukarı tahmin etmek için

Related Videos

0 Views

Last updated: 25 July 2026