JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 2:57 dk. • April 30th, 2023
- Başlamak için, hücre ayrışması için kemik iliği stromal hücreleri ile birlikte kültürlenmiş lösemi hücreleri içeren bir plakaya tripsin ekleyin. Hücre canlılığını korumak için önceden ısıtılmış ortam kullanarak peleti santrifüjleyin ve yeniden askıya alın. G-10 sütunu, bir jel matrisi oluşturmak için suda şişen çapraz bağlı dekstran boncuklar içerir.
Boncuklar arasındaki boşluğu doldurmak için G-10 sütununu önceden ısıtılmış ortamla dengeleyin ve ortamın sütundan yavaşça çıkmasını sağlayın. Hava kabarcıklarının oluşmasını önlemek için kolonda uygun bir sıcaklık sağlayın. Hücre karışımını G-10 kolonundaki jel boncukların üzerine yavaşça yükleyin. G-10 kolonundaki hücreleri istenen süre boyunca oda sıcaklığında inkübe edin. Hücre yüzey özelliklerine ve boyutuna bağlı olarak, jel boncuklar tercihen daha büyük kemik iliği stromal hücrelerini kısıtlayarak lösemi hücrelerinin ayrılmasına izin verir.
Sütuna önceden ısıtılmış ortam ekleyin ve lösemi hücrelerinin süspansiyonunu toplayın. Hücre süspansiyonunu santrifüjleyin ve peleti uygun bir tamponda yeniden süspanse edin. Daha fazla analiz için saf lösemi hücresi popülasyonunu kullanın. Aşağıdaki örnekte, G-10 sütununu kullanarak saf bi
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin