JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 3:57 dk. • April 30th, 2023
- Bir lenfosit sınıfı olan T hücreleri, enfeksiyonla mücadelede aktif rol oynar. Diğer birçok kan hücresi tipinin yanı sıra, immünokompetan T hücreleri fare dalağında ve lenf düğümlerinde bulunur. T hücrelerini seçici olarak izole etmek için, murin dalağı ve lenf düğümlerini toplayın ve bunları bir hücre süzgeci üzerinde yumuşatın. Tek hücreli bir süspansiyon elde etmek için dokuyu uygun bir ortamla yıkayın.
Kırmızı kan hücrelerini parçalamak için amonyum-klorür potasyum veya ACK tamponu ekleyin. Sağlam kan hücrelerini lizattan ayırmak için santrifüjleyin. Süpernatanı atın ve hücreleri uygun bir tamponda yeniden süspanse edin. Süspansiyonu, granülositler, B hücreleri, NK hücreleri ve kalan eritrositler gibi kan hücrelerini hedeflemek için biyotinile antifare antikorlarının bir karışımı ile tedavi edin. T hücreleri hedeflenmemiştir ve bu nedenle etiketlenmemiş olarak kalır.
Ardından, süspansiyona anti-biyotin manyetik mikro boncuklar ekleyin. Tüm biyotin etiketli hücreler mikro boncuklara bağlanır. Güçlü bir manyetik alanın etkisi altında tutulduğunda, manyetik olarak etiketlenmiş hücreler tüp duvarına yapışır. Etiketlenmemiş T hücreleri süspansiyon halinde kalır. Bağlanmamış zengin
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin