JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 5:21 dk. • April 30th, 2023
- Hematopoetik kök ve progenitör hücre veya HSPC, kendi kendini yenileyebilir ve çeşitli kan hücresi tiplerine farklılaşabilir. HSPC'ler, bir ömür boyu yavaş yavaş DNA mutasyonları biriktirir ve bu da lösemiye katkıda bulunabilir. Bu tür mutasyonları analiz etmek için, HSPC'ler genellikle kemik iliğinden üretilir.
Mononükleer hücrelere (kemik iliğinden izole edilen yetişkin kök hücreler) florofor konjuge antikorlar ekleyerek ve bunları istenen süre boyunca inkübe ederek başlayın. Antikorlar, CD34 gibi spesifik hücre yüzeyi belirteçlerine bağlanır. Şimdi, karışımı floresanla aktive edilen hücre sitometrisine veya FACS makinesine yükleyin.
Florofor konjuge antikorlar, lazer tarafından vurulduğunda floresan verir. Bireysel hücre damlacıkları, damlanın bir elektrik yüküne sahip olduğu floresan yoğunluğunu ölçen dedektörden geçer. Elektromanyetik alanların varlığında, pozitif yüklü hücreler negatif kaba hareket eder ve bunun tersi de geçerlidir.
Şimdi, FACS tarafından sıralanmış CD34 pozitif HSPC'leri, klonlar görünene kadar istenen süre boyunca uygun bir ortamda büyütün. Ardından, hücreleri peletlemek için kuvvetli pipetleme ve santrifüjleme ile klonları yerinden çıkarın. Daha fazla an
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin