Negatif İmmünomanyetik Seçim: Periferik Kan Mononükleer Hücrelerinden B Hücrelerini Saflaştırmak İçin Bir Yöntem

Periferik kan mononükleer hücreleri veya PBMC'ler, B hücrelerini, T hücrelerini, doğal öldürücü veya NK hücrelerini ve monositleri içerir. B hücreleri, enfeksiyonla savaşmak için immünoglobulin molekülleri üretir. Lösemide bu hücreler çoğalır ve farklı organlara metastaz yapar.

B hücrelerini izole etmek için, izole edilmiş PBMC'lerin bir süspansiyonu ile başlayın. Farklılaşma kümesi veya CD adı verilen spesifik hücre yüzeyi moleküllerine yönelik birincil antikor karışımı ekleyin. Spesifik antikorlar, T hücreleri üzerindeki CD-3 molekülüne, monositler üzerindeki CD-14 molekülüne ve NK hücreleri üzerindeki CD-16 molekülüne bağlanır ve B hücrelerini etiketsiz bırakır.

Ardından, bağlanmamış antikorları çıkarmak için numuneyi yıkayın. Numuneye ikincil antikor konjuge manyetik mikro boncuklar ekleyin. İkincil antikorlar, spesifik hücrelere bağlı birincil antikorların FC bölgesine bağlanır. Etiketli hücre süspansiyonunu içeren tüpü bir manyetik alanın etkisi altına yerleştirin. Alanda, manyetik olarak etiketlenmiş hücreler göç eder ve tüp duvarına bağlanır, bu da istenmeyen hücrelerin negatif seçimine yol açar. Zenginleştirilmiş B hücreleri içeren süpernatanı yeni bir toplama tüpüne topla