Floresan Etiketli T-ALL Hücreleri İzolasyonu: Yetişkin Zebra Balıklarından T-ALL Hücrelerini İzole Etmek İçin Bir Yöntem

- T hücreli akut lenfoblastik lösemi veya T-ALL, lenfositler olgunlaşamadığında ve lenfoblast adı verilen olgunlaşmamış hücreler olarak kaldığında ortaya çıkan bir kanser türüdür. Bu anormal hücreler enfeksiyonla mücadelede etkisizdir. Bu olgunlaşmamış hücreler hızla bölündükçe, sağlıklı kan hücrelerinden sayıca fazladırlar ve dalak, karaciğer ve CNS gibi organlara gidebilirler.

Zebra balıklarındaki tümörler insanlarda oluşanlara benzer. Bu nedenle, zebra balığı T-ALL tümör hücreleri oluşturmak için tercih edilen modeldir.

Tümör hücrelerinin yayılımını gösteren floresan sinyalleri sergileyen dönüştürülmüş balıkları seçerek başlayın. Ötenazi yapılmış balığın kafasını çıkarın ve fazla kırmızı kan hücrelerini çıkarmak için vücut boşluğunu heparin solüsyonuyla yıkayın. Şimdi, vücut boşluğuna uygun bir tampon enjekte edin. Dışarıdan hafif bir baskı uygulayın ve tümör hücrelerini içeren tamponu bir mikrofüj tüpünde toplayın.

Hücreleri tripan mavisi ile boyayın ve mikroskop altında gözlemleyin. Canlı tümör hücreleri, tripan mavisi ile boyandığında floresan ve renksiz görünür, çünkü negatif yüklü hücre zarı, negatif tripan mavisinin hücre içine girmesini engeller. Tripan mavisi, gözenekli