Name: Şehriye ve Capellini İşleme Testleri: sıçan ve fareler hünerli forepaw fonksiyonu Basit kantitatif tedbirler (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-07-21T17:24:00.000+00:00
Duration: 9 min 37 s
Description: Öğrenin, sıçan ve farelerde şehriye ve capellini işleme testleriyle ön pati becerisini nasıl nicelendireceğinizi. Bu yöntem, sinirsel hasar ve yaşlanmanın motor fonksiyonlar üzerindeki etkisini değerlendirmeye yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar Şehriye İşleme Testi gelişmekte olan Dr. Deanna Adkins, Dr. Marty Woodlee, Cole, Kocalar, Mónica A. Maldonado, Jackie Kane ve Dr. Tim Schallert yardım için teşekkür ve Capellini geliştirilmesine yardım için Lu Chou Testi İşleme. NIH-NINDS (NS05689) ve NIH-NIA (1F31AG034032 01) hibe tarafından desteklenir.

1. Test başlaması için hazırlık <ol><li> Pişmemiş makarna adet jilet kullanarak uzunlukta kesilir. Skinner marka erişte makarna (1.5 mm çapında), sıçanlar için 7 cm uzunlukta kesilir. Fareler için DeCecco marka Capellini makarna (1.0 mm çapında), 2.6 cm uzunlukta (Şekil 1C) kesilir. Makarna marka taşıma şekilde etkileyebilecek doku ve çapı, değişir, çünkü makarna tek bir kaynaktan tekrar tekrar test için kullanılması tavsiye edilir. </li><li> Neophobic yanıtlarını üstesinden gelmek ve taşıma beceri kurmak için, hayvanların test öncesinde hafta içinde evlerine kafes birkaç kez makarna adet maruz kalmaktadır. (Tipik olarak, 5-10 gün maruz kalma, yaklaşık 4 adet her zaman yeterlidir.) </li><li> Ev kafes daha başka bir odasında test uygulanabilir, ya da evde kafes, test, test ortamında yeme alışkanlık için taşınır. (Hayvanlar bu ortamda kolaylıkla makarna yiyorsun kadar genellikle 3-5 oturumları alır.) </li><li> Hayvanlar makarna hevesle kabul sonra bile büyük bir kamera test alanına yanına taşındığında, aniden suskun olabilir. Bir veya daha fazla alışkanlık oturumları için test ortamı ön kamera yerleştirmek yararlı olur. </li><li> Makarna çok lezzetli gibi çoğu hayvanın hareket, çünkü onları önceden test kısıtlamak gıda şart değildir. Ancak, gıda kaldırılması deneyci ve kamera önünde bir kaç saat önce ya da gece yeme kolaylaştırmak ve test zamanda doymak olmadığını sağlamak olabilir. </li><li> Yemek sırasında makarna parçanın kırılması bir deneme geçersiz kılar. Biz hayvan testlerinde kullanılan olanlardan daha uzun adet verilen asla eğer bu alışkanlığı büyük ölçüde önlenmiş olur bulduk. </li><li> Test oturumları için, makarna parçaları kartlar şablonu (erişte, 1.75 cm aralıklarla ve 0.86 cm aralıklarla Capellini ipliklerini) kullanarak belirli aralıklarla bir ultra ince ucu marker ile işaretlenmiştir. Bu yemek sırasında makarna iplikli hareketinin görselleştirme kolaylaştırır. </li></ol> 2. Testi kurdu <ol><li> Hayvanlar evde kafes veya başka bir cihazı unmarred, temiz duvarlar ya da test edilecek ve test seansı sırasında cagemates izole edilmelidir. </li><li> Sıçanlarda uygulanan bir deneyci (Allred ve ark, 2008) tarafından gerçek zamanlı olarak test edilebilir, ancak bu verilerin, slow-motion video oynatma sırasında toplanan böylece, ölçme video kayıt kolaylaştırılmıştır . Biz onların pençeleri ve hızlı hareketler, küçük boyutları nedeniyle yavaş hareket video oynatma olmadan fare forepaw hareketleri güvenilir bir şekilde ölçmek mümkün değildir. </li><li> Yüksek bir kare hızı ve yeterli zoom ile bir video kamera kullanılır. Biz normal oda aydınlatma koşullarında en az 420 s-1 bir obtüratör hızı için ayarlanmış bir 16x zoom lensi ile bir Canon XL1S fotoğraf makinesi kullanın. Kaydırma ve devrilir bir kafa ile tekerlekli bir tripod kullanımı kamera konumlandırma kolaylaştırır. </li><li> Sıçanlar, çömelmiş vaziyette genellikle makarna yemek için dik oturmak ve pençeleri en kolay, hafif bir yükseliş açısı (Şekil 1A) ile yaklaşık odasının zemin seviyesinde yerleştirilmiş kamera ile görülüyor. Talaşı ile bir kafes test, bazı talaş kaldırılması görünümünü optimize etmek için yararlı olabilir. </li><li> Fare, sıçan daha bir açı daha fazla parça tutarak, makarna yerken öne eğilme eğilimindedir. Böylece, açık bir zemine sahip bir test odasının bir aynanın üstüne yerleştirilir. Kamera yere göre biraz daha yüksek bir seviyede yerleştirilir ve aşağıya doğru açılı, aynaya pençeleri (Şekil 1B) yansıması odaklanmak. Ilk yüzey ayna, video oynatımı için pençeleri netlik büyük ölçüde geliştirir. </li><li> Böylece, ses kayıt yeme doğrulamak için yararlıdır, makarna parça Her ısırık duyulur. </li></ol> 3. Makarna taşıma çalışmalarda Yönetme <ol><li> Test oturumları bir makarna parça ile deneme başına yenen, sıralı çalışmaların oluşur. Biz genellikle sıçan ve fare başına 3-4 çalışmalarda başına 4-5 çalışmalardan elde edilen verileri kaydetmek. </li><li> Önce videoya makarna, bir parça yemek başlatmak için uygun bir kamera görüntüsü hayvan taşımak için odasına yerleştirilir. </li><li> Hayvan kamera yüz ve odak ve forepaws ve tüm rakamlar ile ayrık ayarlamaları görmek için yeterince yakınlaştırma (~ 10-12X) için gereklidir. Hem pençeleri eklemleri izlenebilir olmalıdır. Bu kamera ile en az, biz ilgi bölgeye dar, sadece deneme başlangıcından önce otofokus özelliklerini kullanmak yararlı buluyorum. Biz daha sonra manuel netleme geçmek. </li><li> En kısa sürede hayvan ve kamera konumu olduğu gibi, ilk deneme başlatılır. Bir taş düştü ya da sallanırken ve doğrudan hayvanın ön kayıt başlangıcı yeme önce başlatılan. </li><li> Bundan sonra, çalışmaların hemen arkaya verilmiştir. Hayvanların hareket etmez, böylece çalışmalar arasındaki gecikmeleri en aza indirmek için tavsiye ediliroptimum görüntüleme konumunuza. </li><li> Pençeleri yan görüntülenebilir veya odak kayıp olduğu Denemeler gol değildir. </li><li> Öncesi ve tedavi sonrası tarıdır (ark Allred, 2008 örneğin, merkezi sinir sistemi yaralanma sonrası iyileşme) belgelemek için test oturumları gün, örneğin, içinde tekrar edilebilir. </li><li> Bir meydan kameraya göre istenilen pozisyonda yemek için hayvanların elde edilebilir. Bu test öncesi birkaç dakika için kameranın varlığı utangaçtır hayvanları alıştırarak için gerekli olabilir. Hayvanlar, genellikle ideal bir bölge makarna bırakarak ya da sarkan konuma sürülmesi olabilir. Verilen adet numara tokluk önlemek için minimize edilmelidir, ancak bu istenilen konuma gerçekleştirmek için birkaç parça gerekebilir. </li><li> Sıralı birkaç sıçanlarda test etmek için, biz ortasında tekerlekli bir tripod üzerinde kamera ile, bir daire içinde bir defada kendi kafeslerinin birkaç yapılandırmak için bu uygun bulduk. Bir parça, her bir kafesin ideal bir bölge içine düştü ve kamera sonra ilk uygun bir konumda yemeye başlar sıçan taşındı. Bu kamera ve deneyci varlığı alışabilirsin daha yavaş (pozisyon yemek) sıçanlar için daha fazla zaman sağlar ve aynı zamanda daha hızlı sıçanların ısırma sesleri yemek uyarılmış olabilir. </li></ol> 4. Forepaw ayarlamalar Kantitatif video analizi ve yeme zamanı <ol><li> Whishaw &amp; Coles, 1996; Whishaw ve ark, 1997) ve yaşlanma ile ilgili değişiklikler yerken forepaw ayarlamaları analiz sıçanlarda MSS yaralanma sonrası lateralize bozuklukları duyarlı basit bir kantitatif ölçüsüdür (. Allred ve ark, 2008; farelerde (Tennant ve ark, 2009). </li><li> Araştırmanın sayısal kısmı makarna parça ilk ağız içine yerleştirilen zaman başlar ve makarna son pençeleri serbest ve ağzına kaybolur sona erer. </li><li> Video oynatma (~% 50 gerçek zamanlı), ya kare kare ilerleme ayarlamaları belirlemek için, gerektiğinde kullanılır yavaşladı. </li><li> Bir ayarlama her zaman pençe bültenleri ve yeniden temas makarna parça parça üzerinde pençe tutun reformasyon var, ya da basamaklı bir uzantısı fleksiyon ve abduksiyon-adduksiyon (Şekil 2) var sayılır. Sağ ve sol pençe Her bir ayar için ayrı ayrı kaydedilir. </li><li> Pençe, rakam veya pençe tutun yeniden konumlandırılması herhangi bir hareketi ile makarna parça boyunca slaytlar Ayarlamalar sayılmaz . Pençe hareketleri makarna parçası (yani, sonraki parça hareketleri) ile temas halinde değilken de sayılmaz. </li><li> Yemek için zaman da başlangıcı yeme ve makarna ağzına kaybolur biten ile başlayan, her deneme için kaydedilir. Biz, video oynatma ekran özelliklerini kullanarak zamanların rekorunu, ama o da normal hızda oynatma sırasında bir kronometre ile kaydedilebilir. </li><li> Hayvan yeme duraklar, ama parça üzerinde tutun korur, duraklatılmış toplam süre çıkarılır. Yeme bir duraklama sesli ısırma ağız ya da bırakma parçasının iki hareketi açıktır. </li><li> Kısa adet desen işleme değiştirmez, çünkü deneme yeme herhangi bir bölümü sırasında, pençeleri görüntülemek görünmeyebilir ise analiz ihmal ya da hayvan parçası bozulursa. </li><li> Bazı sıçanlar ve fareler, biri diğerinden daha pençe ile sürekli daha fazla ayarlamalar yapmak. Yaralanmaları zarar öncesi test ayarlamaları (Allred ve ark, 2008) yapılan pençe etkiler tek taraflı santral sinir sistemi yaralanma modelleri için, lateralize bozuklukları daha hassas olarak tespit edilir . </li><li> Fareler bazen makarna parçası yeme ortasında açılan ve kısa bir aradan sonra, bu pick up ve yeme devam edin. Bu günün son deneme, muhtemelen kısmi tokluk ve yeme odaklanmak kaybı nedeniyle en yaygın olanıdır. Bu sağlam farelerde bile yaygın olduğundan, bu çalışmaların açığa çıkarmaz. Ancak, parça düştü olduğu zaman, toplam yeme zaman çıkarılır. </li><li> Sağlam sıçanlarda, parçaları bırakarak genellikle çok gecikmiş ya da hiç yemek atipik ve yeniden başlatılması. Bu tür çalışmalar ayarlamaları ve yeme zamanı analiz atlanmıştır. </li><li> Getirmek için yapılan düzeltmeler önce yemek başlangıcı sayılmaz. Ön yiyen kullanım davranışları, merkezi sinir sistemi yaralanmaları (örneğin, Whishaw ve ark, 1992; Whishaw ve ark, 1986) etkilenir, ama biz henüz bu döneme forepaw ayarlamalar için nicel yöntemler uzun değil . </li><li> Bu veriler şu şekilde özetlenebilir: (a), parça başına pençe ortalama ayarlamalar, (b) parça başına ortalama yeme süresi ve ayarlamalar (ayarlamaları / zaman yeme), (c) oranı ortalama sayısı. </li></ol> 5. Atipik kullanım şekilleri Video analizi <ol><li> Atipik kullanım şekilleri sıçanlarda farklı MSS yaralanma türleri (Allred ve ark, 2008) ve recordi ayırt edebilirsinizng bu davranışların tamamlayıcı bir analizi olarak yararlı olabilir. </li><li> İşleme desen sağlam hayvanlar seyrek gözlenir atipik olarak kabul edilir. Bozulmamış hayvanlar genellikle bir pençe, "kavramak pençe" ile yemek başlatmak makarna düşük yerleştirilir ve "kılavuzu pençe" sonra ağız (Şekil 3A, C) yakın bir yerdedir. Aynı pençe genellikle tüm çalışmalarda kavramak pençe. Sıçanlar sık ​​sık pozisyon ilk makarna uzunluğu boyunca birbirinden uzak pençeleri ve kısaltır parçası olarak birlikte hareket ederler. Fareler genellikle yeme başında bile, kavramak ve birbirine yakın tutulan kılavuzu bacaklarda, ağız yakın hem pençeleri pozisyon. Her iki türde de, pençeleri daha simetrik pozisyonlar, yan yana ya parça çok kısa bir zaman (Şekil 3B, D) hane, interpoze taşıyın. Her iki pençeleri makarna, rehberlik, holding ya da ilerleyen yemek yeme sırasında sürekli kullanımda. </li><li> Sıçan ve fareler pençe pozisyonda Atipik kalıpları arasında aşağıdakiler sayılabilir: (a.), makarna parça uzun zaman simetrik bir tutun, pençeleri birlikte yerleştirerek (orijinal boyunun yarısından fazlası), (b) pençeleri taşımak için başarısız parça tamamen tüketilen ve (c) önce simetrik bir pozisyon ortasında yeme kılavuzu ve kavramak bacaklarda pozisyonları geçiş. </li><li> Sıçan ve olan fareler iki ek atipik davranışlar: (a.) ("iletişim başarısızlık") yemek sırasında uzun bir süre için tek bir pençe ile makarna parça ve (b) için başarısız ağız yoluyla makarna çekmek için kullanarak ("ağız çekerek") yeniden konumlandırmak için pençeleri. </li><li> İki davranışları sıçanlar için atipik kabul, ama fareler için tipiktir: (a.) hunched duruş ve (b), yemeye başlar sonra makarna parça bırakarak. Ancak, farelerde damla frekans, merkezi sinir sistemi hasarı sonra artabilir. Böylece, her iki türde de düşüşü frekans kaydedin. </li><li> Diğer atipik davranışlar tek taraflı bir sıçan striatal dopamin eksikliği modeli görülmüştür: (a.) kavramak uzuv yemek sırasında hareketsiz, sert pozisyon düzenlenen bir "demir kavrama", (b) kılavuz pençe hareketi tekrarladı katı kavramak pençe, ve (c) ve aşırı devirme makarna ağzına açılı olarak baş çevresinde (. Allred ve ark, 2008; Whishaw ve ark ayrıca bkz 1997). </li><li> Biz de yaşlı farelerde genellikle ağzına makarna taşımak için etkisizdir ayarlamalar yapmak olduğunu gözlemledik. Böylece, görünür bir hareket ağzına makarna parçası olmasına yol açmaz ayarlamalar ayrı ayrı kaydedilir. </li><li> Kılavuzu anahtarlama ve kavramak bacaklarda çekerek, iletişim hataları, damlaları, ağız ve diğer tüm atipik davranışlar deneme başına bir kez kaydedilir, olay başına kaydedilir. </li></ol> 6. Temsilcisi Sonuçlar Video analiz sonuçları deneme başına her pençe ayarlamaları, her bir makarna parça yemeği için sayı ve zaman içermelidir. Sensorimotor kortikal lezyonu olan fareler ya da serebral iskemi Sonuçlar hayvanlar bozulmuş (kontra-lezyon) uzuv yaralanmaları sonra en az bir ay için kutsal sayılmaktadır bir etkisi daha az ayarlamalar yapmak göstermektedir. Kontralateral bacak ayarlamalar bir azalma ve ipsilateral ekstremite (Allred ve ark, 2008) ile ayarlamalar bir artış hem de tek taraflı dopamin eksikliği neden olur . Farelerden elde edilen sonuçlar, yaşlı hayvanların makarna adet yemek için daha uzun sürebilir ve genç erişkin farelerde (Tennant ve ark, 2009) ile karşılaştırıldığında, ağzına makarna ilerlemesinde yol açmaz daha fazla ayarlamalar yapmak göstermektedir. Atipik kullanım davranışlarını gözlemler bu testlerin analizi de içerebilir. Striatal hasar ve orta serebral arter oklüzyonu ek anormal yeme davranışları (Allred ve ark, 2008) sıklığının artması ile sonuçlanmıştır. <img src="/files/ftp_upload/2076/2076fig1.jpg" alt="Şekil 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 1"> Şekil 1 (A) ve (B) farelerde sıçanlarda Makarna işleme duruş. Sıçanlar, fareler makarna üzerinde önsezileri pençe hareketleri görüntülemek için fare altında bir ayna yerleştirilmesi gerektiren, kıç arkanıza yaslanın olduğunu unutmayın. (C) makarna adet örnekleri test etmek için hazırlanmıştır. <img src="/files/ftp_upload/2076/2076fig2.jpg" alt="Şekil 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 2"> Şekil 2 (AC) ve (DF), bir fare sıçan bir örnek forepaw ayarı. İlk panel düzenleme, daha önce hayvan gösterileri, orta panelde ayar pençe (ler) gösteren bir yıldız, forepaw ayarlama gösterir, ve son panel makarna parça değiştirme gösterir. <img src="/files/ftp_upload/2076/2076fig3.jpg" alt="Şekil 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 3"> Şekil 3 Kılavuzu ve makarna (A, C) (B, D) uzun ve kısa zaman sıçan ve fareler bacak pozisyonları kavramak.

<ol><li>Allred, R. P., Adkins, D. L., Woodlee, M. T., Husbands, L. C., Maldonado, M. A., Kane, J. R., Schallert, T., Jones, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Vermicelli+Handling+Test%3A+a+simple+quantitative+measure+of+dexterous+forepaw+function+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">The Vermicelli Handling Test: a simple quantitative measure of dexterous forepaw function in rats.</a> J. Neurosci. Methods. 170, 229-244 (2008).</li>
<li>Baird, A. L., Meldrum, A., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+staircase+test+of+skilled+reaching+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res.+Bull%22%5BJournal%5D)">The staircase test of skilled reaching in mice.</a> Brain Res. Bull. 54, 243-250 (2001).</li>
<li>Ballermann, M., Metz, G. A., McKenna, J. E., Klassen, F., Whishaw, I. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pasta+matrix+reaching+task%3A+a+simple+test+for+measuring+skilled+reaching+distance%2C+direction%2C+and+dexterity+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">The pasta matrix reaching task: a simple test for measuring skilled reaching distance, direction, and dexterity in rats.</a> J. Neurosci. Methods. 106, 39-45 (2001).</li>
<li>Castro, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+performance+in+rats.+The+effects+of+pyramidal+tract+section%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Motor performance in rats. The effects of pyramidal tract section.</a> Brain Res. 44, 313-323 (1972).</li>
<li>Farr, T. D., Whishaw, I. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+and+qualitative+impairments+in+skilled+reaching+in+the+mouse+%28Mus+musculus%29+after+a+focal+motor+cortex+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Quantitative and qualitative impairments in skilled reaching in the mouse (Mus musculus) after a focal motor cortex stroke.</a> Stroke. 33, 1869-1875 (2002).</li>
<li>Montoya, C. P., Campbell-Hope, L. J., Pemberton, K. D., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+staircase+test+%3A+a+measure+of+independent+forelimb+reaching+and+grasping+abilities+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">The staircase test : a measure of independent forelimb reaching and grasping abilities in rats.</a> J. Neurosci. Methods. 36, 219-228 (1991).</li>
<li>Peterson, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+of+handedness+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Psych+Monographs%22%5BJournal%5D)">Mechanism of handedness in the rat.</a> Comp Psych Monographs. 9, 1-67 (1934).</li>
<li>Tennant, K. A., Adkins, D. L., Donlan, N. A., Asay, A. L., Thomas, N., Kleim, J. A., Jones, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+age+on+motor+skill+learning+and+organization+of+the+forelimb+motor+cortical+representation+in+C57BL%2F6+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Society+for+Neuroscience+Annual+Meeting+abstract%22%5BJournal%5D)">The effect of age on motor skill learning and organization of the forelimb motor cortical representation in C57BL/6 mice.</a> Society for Neuroscience Annual Meeting abstract. , 783-784 (2009).</li>
<li>Tennant, K. A., Jones, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensorimotor+behavioral+effects+of+endothelin-1+induced+small+cortical+infarcts+in+C57BL%2F6+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Sensorimotor behavioral effects of endothelin-1 induced small cortical infarcts in C57BL/6 mice.</a> J. Neurosci. Methods. 181, 18-26 (2009).</li>
<li>Whishaw, I. Q., Coles, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Varieties+of+paw+and+digit+movement+during+spontaneous+food+handling+in+rats%3A+postures%2C+bimanual+coordination%2C+preferences%2C+and+the+effect+of+forelimb+cortex+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Varieties of paw and digit movement during spontaneous food handling in rats: postures, bimanual coordination, preferences, and the effect of forelimb cortex lesions.</a> Behav. Brain Res. 77, 135-148 (1996).</li>
<li>Whishaw, I. Q., Coles, B. L., Pellis, S. M., Miklyaeva, E. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impairments+and+compensation+in+mouth+and+limb+use+in+free+feeding+after+unilateral+dopamine+depletions+in+a+rat+analog+of+human+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Impairments and compensation in mouth and limb use in free feeding after unilateral dopamine depletions in a rat analog of human Parkinson's disease.</a> Behav Brain Res. 84, 167-177 (1997).</li>
<li>Whishaw, I. Q., Dringenberg, H. C., Pellis, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+forelimb+grasping+in+free+feeding+by+rats%3A+motor+cortex+aids+limb+and+digit+positioning%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Spontaneous forelimb grasping in free feeding by rats: motor cortex aids limb and digit positioning.</a> Behav. Brain Res. 48, 112-125 (1992).</li>
<li>Whishaw, I. Q., O'Connor, W. T., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+contributions+of+motor+cortex%2C+nigrostriatal+dopamine+and+caudate-putamen+to+skilled+forelimb+use+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%22%5BJournal%5D)">The contributions of motor cortex, nigrostriatal dopamine and caudate-putamen to skilled forelimb use in the rat.</a> Brain. 109, 805-843 (1986).</li>
</ol>

Bu video, sırasıyla, Şehriye ve Capellini İşleme Testleri sıçan ve fareler nasıl yapılır göstermek. Bu testler, beynin motor sistemleri zarar sonra ya da yaşlanma sırasında, pençe ve normal hayvanlarda haneli işlevi incelemek için basit, kantitatif bir yoldur. Pençe ve araştırmacı her pençe ile yapılan ayarlamalar yanı sıra, deneysel olarak indüklenmiş merkezi sinir sistemi hasarı takiben görülebilir anormal davranışları gözlemlemek ölçmek için izin pişmemiş makarna küçük parçaları işlemek için kullanılan haneli hareketleri slow-motion video analizi. Test oturumları sürekli farklı günlerde yapılan ve hayvanların çoğu, birkaç dakika içinde bir oturumun tamamlaması, tüm duruşmaları olabilir. Böylece, testin daha geniş bir test bataryası ya da deneysel tasarım içine dahil edilmesi için uygundur. Testleri de motor beceri öğrenme (Xu ve ark, 2009), çalışmalarında kullanılan ancak burada zaman içinde kurulmuş bir beceri tahlil değişiklikleri için bir protokol. (; Ballermann ve ark, 2001; Montoya ve ark, 1991. Örneğin, Whishaw ve ark, 1986) ve farelerde (Farr &amp; Whishaw, 2002 Şu anda, yetenekli ulaşan testler sıçanlarda hünerli ön ayakları fonksiyonu en sık kullanılan testler; Tennant &amp; Jones, 2009; Baird ve ark, 2001). Makarna kullanma bimanuel görev ise ulaşmak testleri, her uzuv izole test izin verir. Bununla birlikte, testler (Xu ve ark, 2009) motor korteksin ön ayakları temsil plastisite içerir, her iki test için, yetenekli forepaw fonksiyonu ve beceri edinimi bozuklukları duyarlılıkları benzer. Tecrübemizi ulaşan testleri daha karmaşık ve zahmetli gerçekleştirmek için, bazı deneysel sorular için, bu testler daha verimli bir alternatif sunabilir. Ancak, burada açıklanan testler aksine, yetenekli ulaşan testleri yıllardır kullanılmaktadır (Peterson, 1934) olmuştur ve şimdi çok yönlü, son derece hassas tedbirler ve test parametreleri (Ballermann ve ark, 2001 bir grubunu içerir. Farr &amp; Whishaw, 2002 ; Montoya ve ark, 1991; Whishaw ve ark, 1992). Buna karşılık, Şehriye ve Capellini İşleme Testleri sıçan usta gıda işleme davranışı (Whishaw ve Coles, 1996) nispeten yeni karakterizasyonları uzanır. Yönetim ve analiz hem de bu testler, şüphesiz ince haneli ve bimanuel hareketlerin daha hassas ölçmek için, dil, ağız ve çene koordineli hareketlerini ölçmek için, daha fazla rafine edilmiş ve genişletilmiş, örneğin olabilir.

Şehriye ve capellini İşleme testleri: sıçan ve fareler hünerli forepaw fonksiyonu basit kantitatif tedbirler

The Vermicelli and Capellini Handling Tests: Simple quantitative measures of dexterous forepaw function in rats and mice

Kemirgen yeme davranışı Önceki karakterizasyonları yiyecek parçaları işlemek için forepaw hareketleri koordine kullandıkları ortaya çıkmıştır. Biz bu işi üzerine lateralize bozukluğu ve yaşa bağlı değişiklikler duyarlı forepaw beceri, basit bir niceliksel tedbir geliştirmek için genişletmiştir. Kemirgenler, usta forepaw ve hevesle tüketmek ince makarna parçaları, yönetmek için basamak hareketleri öğrenirler. Biz daha önce, sıçanlarda erişte taşıma nicel yöntemler nitelendirdi ve tedbirler tek taraflı iskemik lezyonlar, orta serebral arter tıkanıklığında ve tek taraflı striatal dopamin eksikliği [Allred, RP Adkins, DL, Woodlee, MT kaynaklanan ön ayakları bozuklukları çok duyarlı olduğunu gösterdi Kocalar, LC, Maldonado MA, Kane, JR, Schallert, T. &amp; Jones, TA Şehriye İşleme Testi: sıçanlarda hünerli forepaw fonksiyonu basit bir kantitatif ölçüsüdür.<em&gt; J. Neurosci. Yöntemleri</em&gt; 170, 229-244 (2008)]. Burada sıçanlarda bu test için daha ayrıntılı bir protokol mevcut ve fareler, Capellini İşleme Test için yeni geliştirilmiş sürümü ile karşılaştırın. Sırasıyla pişmemiş şehriye veya Capellini makarna, kısa uzunluklarda ele sıçan ve fareler pençe hareketleri görünümünü optimize etmek için yerleştirilmiş bir kamera ile videoya. Yavaş hareket video oynatma forepaw ayarlamalar belirlenmesi için basamaklı herhangi bir sayı başlar yeme sonra makarna parçası üzerinde herhangi bir farklı kaldırma ve değiştirme pençe, ya da olarak tanımlanan sağlar. Parça başına Forepaw ayarlamalar her seanstan başına çalışmalarda üzerinde ortalaması alınır. Tekrarlanan test zamanla forepaw maharet değişikliklerin duyarlı kantitatif analiz izin verir. Ön test alışkanlık ve taşıma uygulaması için protokollerin yanı sıra atipik işleme desenleri tanımlamak için prosedürler, açıklanmıştır. Sıçanlar ve fareler biraz farklı makarna işleme testleri, bu testlerin idaresi ve puanlama türe özgü farklılıklar vurgulanır. Tüm hayvan kullanımını University of Texas at Austin Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından onaylanan protokoller uyarınca oldu.

Şehriye ve forepaw beceri Capellini İşleme Testler, becerikli forepaw ve rakam hareketleri kullanarak besin öğeleri işlemek için kemirgenler doğal eğim yararlanmak. Pişmemiş kuru makarna kısa koluyla ele Hayvanlar videoya. Yavaş hareket video oynatma forepaw ayarlamaları ölçümü için izin verir.

Şehriye ve Capellini İşleme Testleri: sıçan ve fareler hünerli forepaw fonksiyonu Basit kantitatif tedbirler

Kemirgenlerin beslenme davranışına yönelik önceki karakterizasyonlar, gıda parçalarını manipüle etmek için koordineli ön pençe hareketleri kullandıklarını ortaya koymuştur. Biz, ...

Bu video, gıda işleme sırasında yetersiz el becerisini nicelleştirmek için kullanılan bir prosedürü göstermektedir. Kemirgenlerde her hayvan, önce kendi kafesinde ve ardından test ortamında kısa uzunluktaki pişmemiş makarnalara maruz bırakılır. Test ortamında, hayvanın ön pati hareketleri videoya kaydedilir. Makarna yeme sırasında, her ön pati ile yapılan ayarlamalar belirlenir ve ağır çekim video oynatma sırasında sayılır.Video analizi sırasında atipik tutma davranışları tanımlanır. Tanımlanan sonuçlar, yemek yeme sırasında gıdayı manipüle etmek için kullanılan hareketlerin miktar tayini yoluyla, beyin hasarı sonrası veya yaşlanma sürecindeki el becerisinin azalmasındaki değişiklikleri göstermektedir. Merhaba, ben Teksas Üniversitesi Austin Bölümü Psikoloji Departmanı'ndaki Teresa Jones laboratuvarından Kelly Tenet ve ben de Jones Laboratuvarı'ndan RNAi.Bugün sizlere sıçanlarda Vermicelli Tutma Testi ve farelerde CAPI tutma testi prosedürlerini göstereceğiz. Laboratuvarımızda bu prosedürleri, beyin hasarı sonrası veya yaşlanma sürecinde, Dexter'ın yiyecekleri tutarken kullandığı dört P'nin nasıl değiştiğini incelemek için kullanıyoruz. Öyleyse başlayalım.Makarna parçalarını teste hazırlamak için, bir karton şablon kullanarak DeCheco marka, CAPI ve Skinner marka vermicelli makarnaları ultra ince uçlu bir kalemle belirli aralıklarla işaretleyin. Capelli için 0.86 centimeter, vermicelli için ise 1.75 centimeter artışlar kullanın. Bu işlem, makarna şeridinin hareketinin görselleştirilmesini kolaylaştırır.Yeme işlemi sırasında, farelerle kullanım için jilet kullanarak capi'yi 2,6 centimeter uzunluğunda; sıçanlar için ise vermicelli'yi yedi centimeter uzunluğunda kesin. Makarna markalarının dokusu ve çapı farklılık gösterebildiğinden ve bu durum uygulama biçimini etkileyebileceğinden, tekrarlanan testler için tek bir makarna kaynağının kullanılması önerilir; neofobik tepkileri aşmak ve uygulama becerisi kazanmak için hayvanları testten önceki haftalarda kendi kafeslerinde makarna parçalarına maruz bırakın. Her seferinde hayvan başına yaklaşık dört parça ile beş ila 10 günlük maruziyet yeterlidir.Alıştırılmış hayvanlar bile kameranın önünde yemek yemeye karşı isteksiz olabilirler. Bu nedenle, bir veya daha fazla alıştırma oturumu boyunca kamerayı test alanının önüne yerleştirin. Hayvanlar makarna parçalarıyla tanıştırıldıktan sonra, onları test ortamına yerleştirin ve orada yemek yemeye alıştırın.Genel olarak, hayvanlar bu ortamda makarnayı kolayca yemektedirler. Hazırlıklar tamamlanmış halde üç ila beş besleme seansından sonra, sıçanlarda ve farelerde makarna uygulama denemelerinin nasıl yürütüleceğine bakalım. Test seansları, her denemede bir adet makarna yenen ardışık denemelerden oluşur.Bir oturum genellikle sıçan başına dört ila beş, fare başına ise üç ila dört denemeden oluşur. Sıçanlar makarnayı yemek için genellikle arka ayakları üzerinde dik otururlar ve çekme hareketleri en kolay bu şekilde gözlemlenir. Kamera yaklaşık olarak oda tabanı seviyesinde ve hafif yukarı doğru bir açıyla konumlandırıldığında, farelerin öne doğru eğilme ve makarnayı belirli bir açıyla tutma eğiliminde oldukları görülür.Bu nedenle, açık tabanlı bir test odası bir aynanın üzerine yerleştirilir. Kamera, tabandan biraz daha yüksek bir seviyeye yerleştirilir ve patilerin aynadaki yansımasına odaklanacak şekilde aşağıya doğru açılılandırılır. Video kaydına başlamadan önce test odasına bir parça makarna yerleştirin.Beslenmeyi başlatmak ve hayvanı uygun kamera açısına getirmek için, hayvan kameraya dönük olmalı ve kamera 10 ila 12 x oranında yeterince yakınlaştırılmalıdır. Hem dört patideki hem de tüm parmaklardaki ayrıntılı düzeltmeleri görebilmek için, hayvan ve kamera konumu ilk deneme düşürmesini başlattığı anda her iki patinin eklemleri görünür olmalıdır veya hayvanın tam önüne bir parça makarna sarkıtılmalı ve kayıt başlatılmalıdır. Beslenme başlangıcından önce, makarna parçasından alınan her ısırık duyulabilir düzeydedir.Böylece ses kaydı, beslenmenin doğrulanması için kullanışlıdır. Kalan denemelerle devam edin. Benzer şekilde, hayvanların optimal görüntüleme konumundan uzaklaşmamaları için denemeler arasındaki gecikmenin en aza indirilmesi en iyisidir.Şimdi dört hatalı düzeltmenin ve yeme süresinin kantitatif video analizinin nasıl yapılacağını görelim. Yemek sırasındaki dört hatalı düzeltmenin analizi, sıçanlarda MSS yaralanması sonrası lateralize bozulmalara ve farelerde yaşa bağlı değişikliklere duyarlı basit bir kantitatif ölçümdür; analiz sırasında video oynatma hızı gerçek zamanın yaklaşık %50'sine düşürülür veya düzeltmeleri belirlemek için gerektiğinde kare kare ilerleme kullanılır. Denemenin kantitifi yapılan kısmı, hamur parçasının ilk kez ağza yerleştirilmesiyle başlar ve hamurun son parçasının gözeneklerden salınıp ağızda kaybolmasıyla sona erer.Gözenek serbest kaldığında ve önceki parçaya yeniden temas ettiğinde her seferinde bir ayar sayılır. Gözenek tutuşu yeniden oluştuğunda veya ekstansiyon, fleksiyon ya da abdüksiyon olduğunda, parmakların abdüksiyonu durumunda, her ayar sol ve sağ gözenek için ayrı ayrı kaydedilir. Gözenek, parmaklarda herhangi bir hareket veya el tutuşunda yeniden konumlandırma olmaksızın ana parça üzerinde kaydığında ayarlar sayılmaz.Yem parçasıyla temas halinde olmadığı zamanlarda farelerin hareketleri de sayılmaz. Yeme süresi, her deneme için başlangıç anından başlayarak yem parçasının ağızda kaybolduğu ana kadar kaydedilir. Hayvan yemeyi durdurur ancak parçayı tutmaya devam ederse, duraksama süresi toplam süreden çıkarılır veya deneme analiz dışı bırakılır.Yemenin herhangi bir aşamasında, duraksama görüntüsü engellenirse veya hayvan parçayı kırarsa (çünkü daha kısa parçalar tutma alışkanlıklarını değiştirir), fareler bazen yeme sırasında makarnayı düşürebilir ve kısa bir aradan sonra tekrar alıp yemeye devam edebilirler. Bu durum dikkat dağınıklığından veya kısmi doygunluktan kaynaklanabilir. Yeme işlemi hızla yeniden başlarsa, bu denemeleri dahil etmiyoruz ancak parçaların düştüğü süreyi toplam yeme süresinden çıkarıyoruz.Video analizinden elde edilen ölçümler; gözenek başına ve parça başına ortalama ayarlama sayısı, parça başına ortalama yeme süresi ve ayarlama hızıdır. Şimdi bazı atipik tutma modellerine göz atalım. Atipik tutma modelleri, farklı MSS yaralanma türlerini birbirinden ayırt edebilir ve yaşa bağlı değişiklikleri ortaya çıkarabilir.Bu davranışların kaydedilmesi, tamamlayıcı bir analiz olarak faydalıdır. Sağlam hayvanlar tipik olarak yemeye, bir pençelerini makarnanın daha aşağısına, diğer pençelerini ise ağza yakın bir konuma yerleştirerek başlarlar. POS'lar genellikle tüm denemelerde aynı pozisyonları alırlar.Atipik bir davranış sergileyerek, hayvan iki uzvun konumlarını değiştirebilir. Sağlam hayvanlarda beslenme sırasında, parça çok kısa olduğunda gözenekler yan yana daha simetrik konumlara veya araya parmaklar girecek şekilde hareket eder. Merkezi sinir sistemi (MSS) yaralanması olan bazı hayvanlar bunu başaramaz ve bunun yerine, parçalar uzun olduğunda kutupları simetrik bir tutuşla yan yana yerleştirir.Sıçanlarda ve farelerde görülen iki ek atipik davranış, yemek sırasında uzun bir süre boyunca makarna parçasının bir gözenekle temas etmemesi ve makarnayı yeniden konumlandırmak için ağızla gözeneklerden çekilmesidir. Kambur duruş ve yemek başladıktan sonra makarnayı düşürmek gibi bazı davranışlar sıçanlar için atipik kabul edilirken, fareler için atipik olmayabilir. Bununla birlikte, farelerde düşürme sıklığı MSS hasarından sonra artabilir, bu nedenle her iki türde de düşürme sıklığının kaydedilmesi faydalıdır.Yaşlı fareler sıklıkla makarnanın ilerlemesiyle sonuçlanmayan düzeltmeler yaparlar. Bu durum, bir düzeltme girişimi makarnanın ağza doğru fark edilebilir bir hareketini sağlamada açıkça başarısız olduğu her seferde sayılır. Şimdi, manipülasyon testlerinden bazı sonuçları göstereceğiz.Sensörimotor kortikal lezyonlu sıçanlardan elde edilen analizler, hayvanların lezyonun kontralateral tarafındaki çekişle, ipsilateral tarafa kıyasla daha az düzeltme yaptıklarını göstermektedir. Tek taraflı orta serebral arter oklüzyonu, hem kontralateral ekstremite ile yapılan düzeltmelerde azalmaya hem de atipik tutma davranışlarında artışa neden olur. Farelerden elde edilen video analizleri, yaşlı hayvanların makarna parçalarını yemek için genç yetişkin farelere kıyasla daha uzun süre harcadıklarını ve makarnanın ağza ilerlemesiyle sonuçlanmayan daha fazla düzeltme yaptıklarını göstermektedir.Sıçanlarda ve farelerde makarna tutma davranışlarının nasıl nicelendirildiğini size göstermiş olduk. Bu prosedürü uygularken, makarna düzenlemelerinin doğru şekilde tanımlandığından emin olmak için değerlendiriciler arası güvenilirliğin kontrol edilmesini hatırlamak önemlidir. Hepsi bu kadar.İzlediğiniz için teşekkürler, deneylerinizde başarılar dileriz.

the-vermicelli-capellini-handling-tests-simple-quantitative-measures

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Burada doğal olarak ortaya çıkan bir davranış sırasında motivasyonu artırmak için kapsamlı bir eğitim ya da yoksunluk gerektirmez haneli hareketleri de dahil olmak üzere hem proksimal ve distal ön ayakları fonksiyonu kurtarma algılayabilen bir kemirgen davranışsal tahlil anlatacağız.

Sıçan proksimal ve distal ön ayakları Fonksiyon değerlendirilmesi için Yeni Bir Yöntem: Irvine, Beatties ve Bresnahan (İBB) ön ayakları Ölçeği

Protokoller iki de kurulan motor koordinasyon görevleri, hızlandırılması rotarod ve yatay çubuk, son zamanlarda Oxford geliştirilen iki test, statik çubuklar ve paralel bar sunulmaktadır. Bu testler motoru potansiyel olarak kendi başlarına ilgi bozuklukları yanı sıra davranış diğer alanlarda testlerde değişkenlerin olmak algılayabilir.

Farelerde Motor Koordinasyon Ölçüm

Kemirgenlerde servikal spinal kord yaralanması sonrası ön ayakları fonksiyonu değerlendirmek için üç yeni davranış testleri (ön ayakları adım münavebe, postural instabilite testi, makarna işleme testi) tarif edilmiştir.

Roman Görevleri kullanılarak tek taraflı Servikal SKY sonra ön ayakları Fonksiyon değerlendirilmesi: Ekstremite Adım münavebe, postural İstikrarsızlık ve Pasta Taşıma

Silindir testi Klasik ön ayakları asimetri analizleri rutin beyin hasarı veya inme aşağıdaki sıçanlarda davranışsal açıkları değerlendirmek için kullanılır; Bununla birlikte, bu farelerin tutarlı açıkları tespit etmek için başarısız olur. Bu çalışma pençe-sürükleme davranışını miktarının farelerde beyin hasarının daha duyarlı bir analiz olduğunu göstermektedir.

Paw-sürükleme: Bir Roman, Fare Silindir Test Hassas Analizi

Sıçanlarda yüksek hassasiyetli yetenekli bir ön ayak ulaşma görevinin edinimini analiz etmek için bir paradigma sunulmuştur.

Nitelikli ön ayakları Sıçanlarda Görev ulaşan bir Yüksek hassasiyet Edinme

Bir paradigma sıçanlarda otomatik yetenekli ulaşan görevin eğitim ve analizi için sunulmuştur. çekme girişimlerinin analizi, motor öğrenme farklı subprocesses ortaya koymaktadır.

Bir Robotik Manipulandum ile motor Beceri Öğrenme Süreçlerinin İncelenmesi

Bu el yazması supinasyon Sıçanlarda quantifies yarı otomatik bir işlemi açıklar. Fareler ulaşmak, kavramak ve küresel bir manipulandum supinate. Dönüş açısı kullanıcı tarafından ayarlanan bir ölçüt aşarsa fareyi bir Pelet ile ödüllendirilir. Bu görev çıktı, yaralanma ve geleneksel görevlere göre nesnellik duyarlılık artar.

Topuzu supinasyon görev: Forelimb işlevi Sıçanlarda değerlendirmek için yarı otomatik bir yöntem

Sunulan median sinir farklı üretmek için bir protokoldür (MN) lezyonlar ve sıçan da onarım. Ayrıca, protokol çeşitli noninvaziv davranış testleri ve fizyolojik ölçümler kullanarak sinirfonksiyonel kurtarma değerlendirmek için nasıl gösterir.

Sıçanda Median Sinir Rejenerasyonunun Değerlendirilmesinde Fonksiyonel ve Fizyolojik Yöntemler

Eğitimin motor becerileri üzerindeki etkisini değerlendirme yöntemi yararlı bir araçtır. Ne yazık ki, çoğu davranışsal değerlendirme emek yoğun ve / veya pahalı olabilir. Burada farelerde prehension (kavrayabilmek) becerisini değerlendirmenin robotik bir yöntemini tanımlıyoruz.

Otomatik Eğitmen Kullanarak Farelerde Vasıflı Prehension'un Değerlendirilmesi

Kemirgen yetenekli ulaşan yaygın becerikli becerileri çalışmak için kullanılır, ama önemli zaman ve çaba görevi uygulamak ve davranışı analiz gerektirir. Biz hareket izleme ve erişim yörüngeleri üç boyutlu yeniden yapılanma ile yetenekli ulaşmanın otomatik bir sürümünü tarif.

Paw ve digit yörüngeleri 3 boyutlu yeniden yapılanma ile ulaşan otomatik Rat tek Pellet

Öğrenin, sıçan ve farelerde şehriye ve capellini işleme testleriyle ön pati becerisini nasıl nicelendireceğinizi. Bu yöntem, sinirsel hasar ve yaşlanmanın motor fonksiyonlar üzerindeki etkisini değerlendirmeye yardımcı olur.

Şehriye ve Capellini İşleme Testleri: sıçan ve fareler hünerli forepaw fonksiyonu Basit kantitatif tedbirler

Daha fazla video keşfet