Name: Yaşlanma ve Amiloid Patoloji sırasında sinaptik değişiklikler Çalışması Sıçanlar ve Transgenik Farelerde akut Hipokampal Dilimleri hazırlanması (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-03-23T14:15:00.000+00:00
Duration: 14 min 57 s
Description: Keşfedin yaşlı sıçan ve transgenik farelerde hipokampal dilim hazırlama yöntemini. Bu protokol sinaptik fonksiyon ve plastisite değişikliklerini inceleyerek yaşlanma ve amiloid patolojisinin bilişsel düşüş üzerindeki etkilerini anlamaya yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

NIH hibe AG027297, bir ödül Kentucky Omurilik ve Kafa Travması Araştırma Güven, ve hediye Kléberg Vakfı tarafından desteklenen çalışın.

<ol><li>Norris, C. M., Halpain, S., Foster, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alterations+in+the+balance+of+protein+kinase%2Fphosphatase+activities+parallel+reduced+synaptic+strength+during+aging%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Alterations in the balance of protein kinase/phosphatase activities parallel reduced synaptic strength during aging.</a> J Neurophysiol. 80, 1567-1570 (1998).</li>
<li>Norris, C. M., Korol, D. L., Foster, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+susceptibility+to+induction+of+long-term+depression+and+long-term+potentiation+reversal+during+aging%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Increased susceptibility to induction of long-term depression and long-term potentiation reversal during aging.</a> J Neurosci. 16, 5382-5392 (1996).</li>
<li>Norris, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hippocampal+%27zipper%27+slice+studies+reveal+a+necessary+role+for+calcineurin+in+the+increased+activity+of+L-type+Ca%282%2B%29+channels+with+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Aging%22%5BJournal%5D)">Hippocampal 'zipper' slice studies reveal a necessary role for calcineurin in the increased activity of L-type Ca(2+) channels with aging.</a> Neurobiol Aging. 31, 328-338 (2010).</li>
<li>Burke, S. N., Barnes, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Senescent+synapses+and+hippocampal+circuit+dynamics%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Senescent synapses and hippocampal circuit dynamics.</a> Trends Neurosci. 33, 153-161 (2010).</li>
<li>Foster, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calcium+homeostasis+and+modulation+of+synaptic+plasticity+in+the+aged+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+Cell%22%5BJournal%5D)">Calcium homeostasis and modulation of synaptic plasticity in the aged brain.</a> Aging Cell. 6, 319-325 (2007).</li>
<li>Foster, T. C., Norris, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-associated+changes+in+Ca%282%2B%29-dependent+processes%3A+relation+to+hippocampal+synaptic+plasticity%5BTitle%5D)+AND+%22Hippocampus%22%5BJournal%5D)">Age-associated changes in Ca(2+)-dependent processes: relation to hippocampal synaptic plasticity.</a> Hippocampus. 7, 602-612 (1997).</li>
<li>Thibault, O., Gant, J. C., Landfield, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expansion+of+the+calcium+hypothesis+of+brain+aging+and+Alzheimer%27s+disease%3A+minding+the+store%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+Cell%22%5BJournal%5D)">Expansion of the calcium hypothesis of brain aging and Alzheimer's disease: minding the store.</a> Aging Cell. 6, 307-317 (2007).</li>
<li>Demuro, A., Parker, I., Stutzmann, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calcium+signaling+and+amyloid+toxicity+in+Alzheimer+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Calcium signaling and amyloid toxicity in Alzheimer disease.</a> J Biol Chem. 285, 12463-12468 (2010).</li>
<li>Green, K. N., LaFerla, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Linking+calcium+to+Abeta+and+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Linking calcium to Abeta and Alzheimer's disease.</a> Neuron. 59, 190-194 (2008).</li>
<li>Kumar, A., Thinschmidt, J. S., Foster, T. C., King, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aging+effects+on+the+limits+and+stability+of+long-term+synaptic+potentiation+and+depression+in+rat+hippocampal+area+CA1%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Aging effects on the limits and stability of long-term synaptic potentiation and depression in rat hippocampal area CA1.</a> J Neurophysiol. 98, 594-601 (2007).</li>
<li>Norris, C. M., Halpain, S., Foster, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversal+of+age-related+alterations+in+synaptic+plasticity+by+blockade+of+L-type+Ca2%2B+channels%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Reversal of age-related alterations in synaptic plasticity by blockade of L-type Ca2+ channels.</a> J Neurosci. 18, 3171-3179 (1998).</li>
<li>Norris, C. M., Scheff, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recovery+of+afferent+function+and+synaptic+strength+in+hippocampal+CA1+following+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Recovery of afferent function and synaptic strength in hippocampal CA1 following traumatic brain injury.</a> J Neurotrauma. 26, 2269-2278 (2009).</li>
<li>Sama, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interleukin-1beta-dependent+signaling+between+astrocytes+and+neurons+depends+critically+on+astrocytic+calcineurin%2FNFAT+activity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Interleukin-1beta-dependent signaling between astrocytes and neurons depends critically on astrocytic calcineurin/NFAT activity.</a> J Biol Chem. 283, 21953-21964 (2008).</li>
<li>Ye, H., Jalini, S., Mylvaganam, S., Carlen, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+of+large-conductance+Ca%282%2B%29-activated+K%28%2B%29+channels+depresses+basal+synaptic+transmission+in+the+hippocampal+CA1+area+in+APP+%28swe%2Find%29+TgCRND8+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Aging%22%5BJournal%5D)">Activation of large-conductance Ca(2+)-activated K(+) channels depresses basal synaptic transmission in the hippocampal CA1 area in APP (swe/ind) TgCRND8 mice.</a> Neurobiol Aging. 31, 591-604 (2010).</li>
<li>Bear, M. F., Malenka, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synaptic+plasticity%3A+LTP+and+LTD%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Synaptic plasticity: LTP and LTD.</a> Curr Opin Neurobiol. 4, 389-399 (1994).</li>
<li>Foster, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Involvement+of+hippocampal+synaptic+plasticity+in+age-related+memory+decline%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res+Brain+Res+Rev%22%5BJournal%5D)">Involvement of hippocampal synaptic plasticity in age-related memory decline.</a> Brain Res Brain Res Rev. 30, 236-249 (1999).</li>
<li>Foster, T. C., Kumar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Susceptibility+to+induction+of+long-term+depression+is+associated+with+impaired+memory+in+aged+Fischer+344+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Learn+Mem%22%5BJournal%5D)">Susceptibility to induction of long-term depression is associated with impaired memory in aged Fischer 344 rats.</a> Neurobiol Learn Mem. 87, 522-535 (2007).</li>
<li>Hsu, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alterations+in+the+balance+of+protein+kinase+and+phosphatase+activities+and+age-related+impairments+of+synaptic+transmission+and+long-term+potentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Hippocampus%22%5BJournal%5D)">Alterations in the balance of protein kinase and phosphatase activities and age-related impairments of synaptic transmission and long-term potentiation.</a> Hippocampus. 12, 787-802 (2002).</li>
<li>Vouimba, R. M., Foy, M. R., Foy, J. G., Thompson, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((17beta-estradiol+suppresses+expression+of+long-term+depression+in+aged+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res+Bull%22%5BJournal%5D)">17beta-estradiol suppresses expression of long-term depression in aged rats.</a> Brain Res Bull. 53, 783-787 (2000).</li>
<li>Abdul, H. M., Furman, J. L., Sama, M. A., Mathis, D. M., Norris, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NFATs+and+Alzheimer%27s+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">NFATs and Alzheimer's Disease.</a> Mol Cell Pharmacol. 2, 7-14 (2010).</li>
<li>Abdul, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cognitive+decline+in+Alzheimer%27s+disease+is+associated+with+selective+changes+in+calcineurin%2FNFAT+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Cognitive decline in Alzheimer's disease is associated with selective changes in calcineurin/NFAT signaling.</a> J Neurosci. 29, 12957-12969 (2009).</li>
<li>Anantharaman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beta-amyloid+mediated+nitration+of+manganese+superoxide+dismutase%3A+implication+for+oxidative+stress+in+a+APPNLH%2FNLH+X+PS-1P264L%2FP264L+double+knock-in+mouse+model+of+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Beta-amyloid mediated nitration of manganese superoxide dismutase: implication for oxidative stress in a APPNLH/NLH X PS-1P264L/P264L double knock-in mouse model of Alzheimer's disease.</a> Am J Pathol. 168, 1608-1618 (2006).</li>
<li>Gengler, S., Hamilton, A., Holscher, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synaptic+plasticity+in+the+hippocampus+of+a+APP%2FPS1+mouse+model+of+Alzheimer%27s+disease+is+impaired+in+old+but+not+young+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Synaptic plasticity in the hippocampus of a APP/PS1 mouse model of Alzheimer's disease is impaired in old but not young mice.</a> PLoS One. 5, e9764-e9764 (2010).</li>
<li>Stringer, J. L., Lothman, E. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+effects+of+extracellular+calcium+concentrations+on+hippocampal+pyramidal+cell+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">In vitro effects of extracellular calcium concentrations on hippocampal pyramidal cell responses.</a> Exp Neurol. 101, 132-146 (1988).</li>
<li>Landfield, P. W., Pitler, T. A., Applegate, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+high+Mg2%2B-to-Ca2%2B+ratios+on+frequency+potentiation+in+hippocampal+slices+of+young+and+aged+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">The effects of high Mg2+-to-Ca2+ ratios on frequency potentiation in hippocampal slices of young and aged rats.</a> J Neurophysiol. 56, 797-811 (1986).</li>
<li>Ames, A. 3rd, Sakanoue, M., Endo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NA%2C+K%2C+CA%2C+MG%2C+AND+C1+CONCENTRATIONS+IN+CHOROID+PLEXUS+FLUID+AND+CISTERNAL+FLUID+COMPARED+WITH+PLASMA+ULTRAFILTRATE%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">NA, K, CA, MG, AND C1 CONCENTRATIONS IN CHOROID PLEXUS FLUID AND CISTERNAL FLUID COMPARED WITH PLASMA ULTRAFILTRATE.</a> J Neurophysiol. 27, 672-681 (1964).</li>
<li>Gant, J. C., Sama, M. M., Landfield, P. W., Thibault, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+and+simultaneous+emergence+of+multiple+hippocampal+biomarkers+of+aging+is+mediated+by+Ca2%2B-induced+Ca2%2B+release%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Early and simultaneous emergence of multiple hippocampal biomarkers of aging is mediated by Ca2+-induced Ca2+ release.</a> J Neurosci. 26, 3482-3490 (2006).</li>
<li>Thibault, O., Hadley, R., Landfield, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elevated+postsynaptic+%5BCa2%2B%5Di+and+L-type+calcium+channel+activity+in+aged+hippocampal+neurons%3A+relationship+to+impaired+synaptic+plasticity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Elevated postsynaptic [Ca2+]i and L-type calcium channel activity in aged hippocampal neurons: relationship to impaired synaptic plasticity.</a> J Neurosci. 21, 9744-9756 (2001).</li>
<li>Thibault, O., Landfield, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increase+in+single+L-type+calcium+channels+in+hippocampal+neurons+during+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Increase in single L-type calcium channels in hippocampal neurons during aging.</a> Science. 272, 1017-1020 (1996).</li>
<li>Stutzmann, G. E., Caccamo, A., LaFerla, F. M., Parker, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dysregulated+IP3+signaling+in+cortical+neurons+of+knock-in+mice+expressing+an+Alzheimer%27s-linked+mutation+in+presenilin1+results+in+exaggerated+Ca2%2B+signals+and+altered+membrane+excitability%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Dysregulated IP3 signaling in cortical neurons of knock-in mice expressing an Alzheimer's-linked mutation in presenilin1 results in exaggerated Ca2+ signals and altered membrane excitability.</a> J Neurosci. 24, 508-513 (2004).</li>
<li>Stutzmann, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+ryanodine+receptor+recruitment+contributes+to+Ca2%2B+disruptions+in+young%2C+adult%2C+and+aged+Alzheimer%27s+disease+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Enhanced ryanodine receptor recruitment contributes to Ca2+ disruptions in young, adult, and aged Alzheimer's disease mice.</a> J Neurosci. 26, 5180-5189 (2006).</li>
<li>Lee, H. K., Min, S. S., Gallagher, M., Kirkwood, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NMDA+receptor-independent+long-term+depression+correlates+with+successful+aging+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">NMDA receptor-independent long-term depression correlates with successful aging in rats.</a> Nat Neurosci. 8, 1657-1659 (2005).</li>
<li>McNaughton, B. L., Douglas, R. M., Goddard, G. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synaptic+enhancement+in+fascia+dentata%3A+cooperativity+among+coactive+afferents%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Synaptic enhancement in fascia dentata: cooperativity among coactive afferents.</a> Brain Res. 157, 277-293 (1978).</li>
</ol>

Bu video-makale üretim Leica Microsystems tarafından sponsor oldu.

Bu protokolde belirtilen adımları beyin diseksiyonları, yaşlı, genç erişkin sıçan gibi en azından hızlı ve verimli bir şekilde yapılmaktadır sigorta yardımcı olacaktır. Biz de LTP ve LTD kendi dilim çalışmalar kurmak için yeni başlayanlar için yeterli ayrıntı sağlar. Yaşlanma ve sinaptik fonksiyon ve plastisite AD değişiklikleri daha fazla arama hedeflerinden biri ise, bir daha görüşülmek hak yukarıda ima en az iki metodolojik konular, vardır. İlk olarak, çeşitli laboratuvarlar gösterilen Ca 2 +: Mg2 + ACSF hipokampal dilim 2,10,24,25 indüksiyon sinaptik plastisite üzerinde belirgin bir etkisi olabilir kayıt oranı. Memeli BOS, Ca 2 +: Mg2 + oranı yaklaşık biri (örneğin 26 görmek). Ancak, ACSF Ca 2 +: Mg2 + yakın 2 oranları sinaptik fonksiyon ve plastisite dilim çalışmaları yaygın olarak kullanılmaktadır. Erken çalışmalarda, bu uygulama muhtemelen LTP indüksiyon optimize etmek için adapte oldu, ardından tüm plastisite çalışmaları için bir rutin haline geldi. Ancak, bu uygulama nöronal Ca 2 + düzenleme iyi karakterize farklılıklar nedeniyle yaşlanma ve AD çalışmaları sorunlu olabilir. Özellikle, Ca 2 + akını ve / veya Ca 2 +-indüklenen Ca 2 +-sürüm 3,27-31 nöronal aktivasyon sırasında yaşlı sıçan ve / veya AD modeli fareler yüksek. LTD İndüksiyon ACSF Ca 2 + düzeyleri ince değişiklikler özellikle duyarlıdır. Mg2 yakın iki + oran, erişkinlerde sağlam LTD gözlenen var içinde: 2mm Ca 2 + ve 2 mM Mg2 +,, yaşlı, ama 2 yetişkin hayvanların genç değil LTD yaygın sonuçları ise bir Ca 2 kullanarak çalışmalar + kullanan Bizim protokol, 32 yaşlı sıçanlarda azaltılmış LTD ile birlikte bir yaş farkı 2,10 ya da yokluğu. Bu gözlemler, yaşlı ve genç erişkin hayvanlarda Ca 2 + bağımlı plastisite karşılaştırırken dikkatle ACSF Ca 2 + ve Mg2 + düzeyleri dikkate almak gerektiğini vurgulayın. Ikinci metodolojik sorunu postsinaptik depolarizasyon 33 ve sinaptik gücü yaşlanma / genotip farklılıklar LTP güçlü bağımlılık ilgilidir. Tipik bir LTP deney, temel ve LTP stimülasyon yoğunluğu, genellikle bir buçuk maksimal (veya üç çeyrek) EPSP maksimum genlik üretmek için ayarlanır. Potansiyel bir sorun, yaşlı sıçanlar ve APP/PS1 fareler, genellikle bazal EPSP değerleri de yaşlı sıçanlar ve APP/PS1 fareler daha küçük olacağı anlamına, genç ve / veya yabani tip meslektaşları göre sinaptik gücü azalır göstermektedir. Daha küçük EPSPS LTP 33 indüklemesi için daha düşük bir olasılık, LTP stimülasyon sırasında daha az depolarizasyon çevirmek olabilir . Çünkü bu potansiyel bulandırabilir, bu hayvanların verim açığı, bir plastisite açığı ya da her iki sergi belirlemek zordur. Yani, yaşlı ve / veya APP/PS1 fareler LTP indüksiyon mekanizmaları (hayır plastisite açığı) işlevsel sağlam olabilir, ama yetersiz, bu koşullar altında (verim açığı) uyarılır. Bu ayrım, hacmi ve plastisite mekanizmaları mekanizmaları belirli bir farmakolojik tedavi çok farklı tepki olarak kritik öneme sahiptir. Biz LTP stimülasyon öncesinde tüm dilimleri boyunca aynı seviyede (örneğin 1 mV) EPSP genlik normalleştirilmesi LTP indüksiyon azaltılmış throughput etkisini en aza indirmek için çalışıyoruz. Diğer stratejiler de etkili olabilir (örneğin, voltaj ya da akım kelepçe kullanımı LTP stimülasyon sırasında gruplar arasında membran potansiyeli eşitlemek için) ve bu hayvan modellerinde LTP soruşturma zaman düşünülmelidir.

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktifin Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td></tr><tr><td> NaCl </td><td> Balıkçı </td><td> BP358-1 </td></tr><tr><td> KCl </td><td> Balıkçı </td><td> BP366-500 </td></tr><tr><td> KH 2 PO 4 (tekbazlı) </td><td> Sigma </td><td> P5379-100G </td></tr><tr><td> MgSO 4 </td><td> Sigma </td><td> M2643-500G </td></tr><tr><td> CaCl 2 (dihidrat) </td><td> Sigma </td><td> C3306-250G </td></tr><tr><td> NaHCO 3 </td><td> Balıkçı </td><td> S233-500 </td></tr><tr><td> C 6 H 12 O 6 (dekstroz) </td><td> Balıkçı </td><td> BP350-1 </td></tr></tbody></table> Tablo 1. Reaktifler gerekli <table border="1"><tbody><tr><td> Ekipman Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td><td> Yorumlar </td></tr><tr><td> Erlenmeyer şişeler </td><td> Balıkçı </td><td> FB-500-2000 FB-500-1000 </td><td></td></tr><tr><td> Akvaryum bubbler </td><td></td><td></td><td> Oksijen medya için kullanılır. Pek çok evcil hayvan mağazasında </td></tr><tr><td> 50 ml Cam beher </td><td> Balıkçı </td><td> 02-540g </td><td> ACSF beyin storarge için </td></tr><tr><td> Parafilm </td><td> Balıkçı </td><td> 13-374-10 </td><td></td></tr><tr><td> Küçük Hayvan Giyotin </td><td> Dünya Hassas Aletler (TEFE) </td><td> DCAP-M </td><td></td></tr><tr><td> Düz kağıt havlu </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> # 11 Feather cerrahi bıçak </td><td> Balıkçı </td><td> 08-916-5B </td><td></td></tr><tr><td> Beebee kemik makas </td><td> Güzel Bilim Araçları (FST) </td><td> 16044-10 </td><td></td></tr><tr><td> Lempert Rongeurs </td><td> Roboz </td><td> RS-8321 </td><td> Sıçanlar için kullanın </td></tr><tr><td> Friedman-Pearson Rongeurs </td><td> FST </td><td> 16020-14 </td><td> Fareler ya da sıçanlar için kullanın. </td></tr><tr><td> Hippocampus aracı </td><td> FST </td><td> 10099-15 </td><td></td></tr><tr><td> Kaşık </td><td></td><td></td><td> Plastik bir çay kaşığı yapacak </td></tr><tr><td> Spatula </td><td> Balıkçı </td><td> 21-401-25A </td><td> Spatula </td></tr><tr><td> Cerrahi iris makası </td><td> FST </td><td> 14058-09 </td><td></td></tr><tr><td> plastik transferi pipetler </td><td> Balıkçı </td><td> 13-711-43 </td><td></td></tr><tr><td> 110mm Whatman filtre kağıdı </td><td> Balıkçı </td><td> 09-805E </td><td> Whatman kedi. 1001-110 </td></tr><tr><td> Cam petri </td><td> Balıkçı </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Leica VT1000P Manuel Mikrotom Titreşimli </td><td> Vibratome </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 0.1mm FA-10 Feather G bıçak </td><td> Ted Pella </td><td> 121-9 </td><td> 0.1mm FA-10 Feather G bıçak </td></tr><tr><td> Borosilikat Pasteur pipetleyin (kauçuk ampul) </td><td> Balıkçı </td><td> 13-678-20A </td><td> Dilimleri transfer için: İpucu büyük açılış kopmuş ve ısı parlatılır </td></tr><tr><td> 35 mm Polysterine Kültür çanağı </td><td> Corning </td><td> 430588 </td><td> Diseksiyonu sonra dilimleri toplamak için kullanılır </td></tr></tbody></table> Tablo 2. Araçlar ve diseksiyon için malzeme <table border="1"><tbody><tr><td> Yapı / Malzeme </td><td> Şirket </td><td> Yorumlar (isteğe bağlı) </td></tr><tr><td> Holding kamara </td><td> Özel Yapım </td><td></td></tr><tr><td> P-97 Yatay Pipet Çektirme </td><td> Sutter Instrument Co. </td><td></td></tr><tr><td> Titreşim izolasyonu tablosu </td><td> Teknik Manufacturing Corporation (TMC) </td><td></td></tr><tr><td> Faraday kafesi </td><td> Özel inşa </td><td></td></tr><tr><td> Alt tabancası ile Pyrex Aspiratör Şişe (Ürün # 1220-1L) </td><td> Corning </td><td></td></tr><tr><td> Regülatör ile Gravite-contolled IV seti (Ürün # 2C8891) </td><td> Baxter </td><td></td></tr><tr><td> Merkezi Vakum Hattı </td><td></td><td> En modern laboratuvarları </td></tr><tr><td> % 95 O 2 /% 5 CO 2 Gaz Mix </td><td> İskoçyalıt-Brüt Co. </td><td></td></tr><tr><td> TygonTM Lab boru O 2 / CO 2 teslimat için </td><td> Fisher Scientific </td><td> Non-toksik, non-oksitleyici, çeşitli boyutlarda gelir. </td></tr><tr><td> Eclipse E600FN Mikroskop </td><td> Nikon </td><td> infared filtresi, GFP, DS-Red2 filtreler yakın 10x ve 40x hedefleri, </td></tr><tr><td> Cool Ek Bileşen ES Dijital Fotoğraf Makinesi </td><td> Photometrics </td><td> Cool Ek Bileşen ES Dijital Fotoğraf Makinesi </td></tr><tr><td> X-Cite Floresan Aydınlatıcı </td><td> EXFO </td><td> X-Cite Floresan Aydınlatıcı </td></tr><tr><td> Mikroskop Platformu </td><td> Siskiyou </td><td> Özel toplandı </td></tr><tr><td> RC-22 Dalgıç kayıt odası (Ürün # 64-0228) </td><td> Warner Instruments (WI) </td><td> P-1 platformu ve sahne adaptörü (Warner itibaren Ürün # 64-0277) gerektirir </td></tr><tr><td> TC2BIP 2/3Ch sıcaklık kontrol </td><td> Hücre Microcontrols </td><td> TC2BIP 2/3Ch sıcaklık kontrol </td></tr><tr><td> 4 Eksen Kılavuzu Minyatür manipülatör </td><td> Siskiyou </td><td></td></tr><tr><td> Platin Iridium Tel (0.002 in) (Madde PTT0203) </td><td> TEFE </td><td></td></tr><tr><td> A365 Stimulus Isolator </td><td> TEFE </td><td> A365 Stimulus Isolator </td></tr><tr><td> 700b Amplifikatör Multiclamp </td><td> Akson Aletleri </td><td></td></tr><tr><td> Digidata 1322A A / D dönüştürücüsü </td><td> Akson Aletleri </td><td></td></tr><tr><td> PClamp yazılım </td><td> Akson Aletleri </td><td></td></tr><tr><td> Kişisel Bilgisayar (Pentium 4) </td><td> Vadi </td><td></td></tr></tbody></table> Tablo 3 Elektrofizyoloji ekipman ve malzemeleri

yaşlanma ve amiloid patoloji sırasında sinaptik değişiklikler Çalışması sıçanlar ve transgenik farelerde akut hipokampal dilimleri hazırlanması

Preparation of Acute Hippocampal Slices from Rats and Transgenic Mice for the Study of Synaptic Alterations during Aging and Amyloid Pathology

Kemirgen hipokampal dilim hazırlık memeli sinaptik fonksiyon ve plastisite araştırmak için belki de en çok kullanılan araçtır. Hipokampus sıçan ve fareler hızlı ve kolay bir şekilde ayıklanır ve dilim oksijenli yapay beyin omurilik sıvısı saat canlı kalır olabilir. Ayrıca, temel electrophysisologic teknikleri hipokampal dilimleri sinaptik fonksiyon soruşturma kolayca uygulanır ve bazı bilişsel bozukluklar için en iyi biyobelirteç sağladı. Hipokampal dilim, öğrenme ve hafıza yer sinaptik plastisite mekanizmalarının çalışma için özellikle popüler. Hipokampal dilimleri (veya eksikliği bunların), sinaptik etkinliği uzun vadeli potansiyasyonu ve depresyon (LTP ve LTD) indüksiyon değişiklikler, bilişsel-engelli hayvan ve / nörolojik fenotip tanımlamak için ya da eylem mekanizması değerlendirmek için sık sık kullanılır nootropic bileşikler. Bu makale hipokampal dilim sıçan ve transgenik farelerin beyin yaşlanması ve Alzheimer hastalığı (AH) 1-3 ile ilişkili sinaptik değişiklikler çalışma için hazırlamak için kullanılan prosedürler sıralanıyor. Yaşlı sıçanlarda ve AD modeli fareler kullanımı, araştırma genç sıçan ve / ya da fare kullanarak alışık araştırmacılara özel bir takım zorluklar ortaya çıkabilir. Yaşlı sıçanlarda beyin çekimi ve / veya diseksiyonu gecikme ve dolayısıyla sinaptik fonksiyon ve plastisite gerçek yaşı farklılıklar inkâr veya abartmak genç sıçanlar ve fareler, daha kalın kafatasları ve sert bağ dokusu var. Yaşlanma ve amiloid patoloji yine fizyolojik değerlendirme alınan herhangi bir çıkarımlar komplike diseksiyon işlemi sırasında sürekli hipokampal hasar alevlendirebilir. Burada, biz bu problemleri en aza indirmek için diseksiyon işlemi sırasında atılan adımları tartışacağız. Örnekler, &quot;sağlıklı&quot; ve &quot;sağlıksız&quot; bir dilim sıçan ve fareler elde sinaptik yanıtlarının yanı sıra temsili sinaptik plastisite deneyler sağlanmaktadır. Bu hayvan modellerinde (örneğin, kayıt çözümü bileşenleri, stimülasyon parametreleri) sinaptik fonksiyon diğer metodolojik faktörlerin olası etkileri de tartışılmıştır. Bu makalenin odak noktası, yaşlı sıçanlar ve transgenik fareler, acemiler fizyolojisi dilim kullanımı olsa da, burada çeşitli kemirgen modelleri kullanarak, kendi çalışmalarına başlamak için yeterli detay bulmalısınız.

Bu makale, sıçan ve transgenik farelerin hipokampal dilimler sinaptik değişiklikler, beynin yaşlanma ve Alzheimer hastalığı gibi nörodejeneratif hastalıklar, yaşa bağlı ile ilgili çalışma için hazırlamak için prosedürler sıralanıyor.

Yaşlanma ve Amiloid Patoloji sırasında sinaptik değişiklikler Çalışması Sıçanlar ve Transgenik Farelerde akut Hipokampal Dilimleri hazırlanması

Kemirgen hipokampal kesit hazırlığı, memeli sinaptik fonksiyonunu ve plastisitesini incelemek için belki de en yaygın olarak kullanılan araçtır. ...

Kemirgen hipokampal dilimleri, memeli sinaptik fonksiyon ve plastisite çalışmalarında sıklıkla kullanılır. Burada, genç sıçan ve farelere göre daha kalın kafataslarına ve daha sert bağ dokusuna sahip olan yaşlı sıçan ve farelerden dilim elde etme ve bunları inceleme protokolünü sunmaktayız. Bu özellikler beyin çıkarımını ve/veya diseksiyonu geciktirebilir ve sonuç olarak sinaptik fonksiyon ve plastisitedeki gerçek yaş farklarını yok sayabilir veya abartabilir.Ek olarak, yaşlanma ve amiloid patolojisi, diseksiyon prosedürü sırasında meydana gelen hipokampal hasarı şiddetlendirebilir ve fizyolojik değerlendirmeden çıkarılan çıkarımları daha da karmaşık hale getirebilir. Bu gösterimde, bu sorunları en aza indirmek için ekstraksiyon ve diseksiyon prosedürleri sırasında alınan önlemleri tartışıyoruz. İlk olarak, beyin hızla çıkarılır ve buzlu, soğuk, düşük kalsiyumlu, yapay serebrospinal sıvıya yerleştirilir.Ardından hippo campi, buzla soğutulmuş bir diseksiyon platformu üzerinde nazikçe çıkarılır ve vibratom kullanılarak hipokampal kesitler hazırlanıp oksijenlendirilmiş kalsiyum içeren A CSF içerisinde inkübe edilir. Son olarak, birden fazla hipokampal alt bölgede sinaptik potansiyeller ve akımlar uyarılır ve kaydedilir; elde edilen sonuçlar yaşlanmanın ve/veya Alzheimer benzeri patolojinin sinaptik fonksiyon ve plastisite üzerindeki etkilerini ortaya koyar. Bu tekniğin doğru kullanımı, yaşa bağlı bilişsel gerileme ve Alzheimer hastalığına bağlı demans için önem taşımaktadır.Bunun nedeni, sinaptik disfonksiyonun bu klinik semptomların en erken biyobelirteçlerinden biri olmasıdır ve bu prosedür bunu kanıtlamaktadır. Bugün, laboratuvarın yürütücüsü Dr. Chris Norris, büyük bir lavabonun yanında olacak. Beyin çıkarma ve hipokampüs diseksiyonu için diseksiyon alanını hazırlayın.Katlanmış bir kağıt havlu, 11 numara bistüri ucu, BB makas, kemik pensi ve fine surgical tool marka özel bir çift taraflı spatula olan hipokampüs aleti ekleyin. Ayrıca küçük cerrahi makaslar, ince bir spatula, plastik Perto pipet, watman filtre kağıdı, buzla doldurulmuş 100 milimetre cam petri kabı, plastik bir kaşık ve kısmen çözünmüş kalsiyumsuz param ile kaplanmış bir CSF beheri yerleştirin.Sıçanın kafası kesildikten sonra, beyin mümkün olan en hızlı şekilde çıkarılmalıdır. Kafayı kağıt havlu üzerine yerleştirin ve skalpel kullanarak burun kemiğinden oksipital kemiğe kadar saçlı derinin ortasından hızlıca bir kesi yapın.Kutanöz kası tamamen kestiğinizden ve kafatası sütürlerini tamamen açığa çıkardığınızdan emin olun. Kafayı sıkıca tutun ve orta hat sütürü boyunca oksipital, parietal ve frontal plakaları kesin. Alt makasın kafatasının iç yüzeyine sıkıca dayalı olduğundan ve beyinden uzak tutulduğundan emin olun.İstemsizce oyulmaları önlemek için bu adım kritiktir. Sonraki slayt. Ron penslerini sol parietal plak altına yerleştirin ve ağızları birbirine doğru sıkarak, parietal ve oksipital plakları ayırmak için yukarı ve ileri doğru yuvarlayarak çekin.Gerekiyorsa, sol frontal plakayı da çıkarmak için Ron penslerini kullanın. Diğer hemisfer için işlemi tekrarlayın. Plakalar yerinden çıkarıldıktan sonra, temporal plakalara yapışmış ve beynin yüzeyine doğru gerilmiş olan herhangi bir dura mater'i nazikçe çekip ayırmak veya kesmek için Ron penslerini veya makasları kullanın.Şimdi Ron jürilerini beyin ile sağ temporal plaka arasına kaydırın; kafatasına doğru baskı uygulayarak beyinden uzak tutun. Bir çıtırtı duyulana veya hissedilene kadar temporal plakayı sıkıştırıp dışarı doğru döndürün. Aynı işlemi sol taraf için tekrarlayın.Geniş spatulayı, hippocampal aracın önüne, beynin ventral yüzeyi ile alt kafatası plakaları arasına, tamamen beynin altına girene kadar kaydırın. Hipocampal aracı kullanarak, sağlam kraniyal sinirleri kesmek için spatulayı yanlara ve ileri geri birkaç kez hareket ettirin. Beyni dışarı çıkarıp kalsiyum içermeyen A CSF çözeltisine daldırın, üzerine Parfum ekleyerek kapatın ve yaklaşık bir dakika boyunca soğumasını bekleyin.Hippocampusları çıkarmak için, beyni A CSF'den almak için bir kaşık kullanın ve buz gibi soğuk bir petri kabının kapağındaki CSF ile nemlendirilmiş watman kağıdının üzerine yerleştirin. Skalpel bıçağını kullanarak serebellumu ve rostral frontal lobların yaklaşık dörtte birini çıkarın. Şimdi, iki hemisferi tamamen ayırmak için intrahemisferik fissür boyunca kesin.Bir hemisferi tekrar A CSF slushie içerisine yerleştirin ve diğerini, frontal lobun koronal düzlemi aşağı bakacak şekilde diseksiyon tablası üzerine dik olarak konumlandırın; beyaz beyin sapı ve mezensefalon, üzerindeki pembe veya grimsi korteksten kolayca ayırt edilebilmelidir. Mezensefalon üzerindeki calli yapılarını bulun. Bunlar iki beyaz çıkıntı şeklinde görünecek ve beynin üst kısmında yer alacaktır.Bu yönlendirmede, orta beyni makasla nazikçe sabit tutun ve spatulayı kallozum ile korteks arasına kaydırın. Ardından beyin sapını, orta beyni ve talamusu nazikçe ayırın. Bağ dokusu veya damarların makasla kesilmesi gerekebilir.Forniksi kesmek için spatulanın keskin kenarını kullanın. Hipokampusun ön dorsal kısmında yer alan beyaz bir fiber demetidir. Makasla, beyin sapını, orta beyni ve talamusu beynin geri kalanından tamamen ayırmadan nazikçe çekmeye devam edin.Hipokampusun alt kısmında sığ bir hiperbol oluşturan beyaz lif demeti bu yönelimde artık görünür olmalıdır. Transfer pipetini kullanarak, hipokampusu korteksten ayırmaya yardımcı olmak için FIA altındaki boşluğa nazikçe biraz A CSF püskürtün. Spatulayı nazikçe bu boşluğa yerleştirin ve makasla beyin sapını, orta beyni ve talamusu sıkıca tutarken hipokampusu nazikçe dışarı doğru yuvarlayın; kalan korteks, kan damarları ve beyaz maddeyi hipokampustan nazikçe temizleyin.Birkaç mililitre A CSF ile yıkayın. Transfer pipeti kullanarak, dokuyu bir CSF karı ile ıslak ve soğuk tutun. Ardından, diğer hemisferi çıkarın ve fare hipokampuslarını kesitlemek için diseksiyonu tekrarlayın.Vibratomun rezervuarını, kesme tablası ve bıçağı tamamen kapatacak şekilde buz gibi, kalsiyumdan arındırılmış A CSF ile doldurun. Her bir hipokampüsün rostral ve caudal uçlarını kesmek için bir neşter kullanın ve bunları rostral yüzeylerinden, her bir hipokampüsün dentat girusu birbirine bakacak şekilde yan yana getirin. Beyin dokusunu bir montaj bloğuna yapıştırın ve vibratomun kesme tablasına aktarın.Sinaptik fizyoloji deneyleri için 400 mikrometrelik kesitler önerilir. Geniş ağızlı bir transfer pipeti kullanarak kesitleri, buz gibi soğuk kalsiyumsuz bir CSF içeren küçük bir Petri kabına aktarın.Dilimleme işlemi tamamlandıktan sonra, dilimler oksijenlendirilmiş kalsiyum içeren A CSF ile doldurulmuş bekleme haznesine aktarılır. Temel hücre dışı kayıtlar gerçekleştirmek için hazne sıcaklığı kademeli olarak 27 dereceden 32 derece Celsius'a çıkarılır. Akut dilimlerde, kayıt haznesi mikroskop tablası üzerine, önceden ısıtılmış A CSF'nin bir akış regülatörü aracılığıyla yer çekimiyle besleneceği ve merkezi bir vakum hattı ile uzaklaştırılacağı şekilde yerleştirilir.Küçük bir boya fırçası kullanarak, bir dilimi A CSF içine batacak ve yerleştirilen ağ üzerinde duracak şekilde kayıt odasına aktarın. Dilimin 10 ila 15 dakika boyunca adapte olmasını bekleyin. Dilim adapte olurken, stimülatörü veya stimulus izolatörünü açın ve çıkış gücünü sıfıra indirin.Ardından, uyarıcı elektrodu kesit üzerindeki stratum radiatum bölgesinde, ca2'nin ca3 sınırına yakın bir noktaya yerleştirin. Kayıt elektrodunu, kesitin yüzeyini hafifçe geçecek şekilde ca1 stratum radiatum tabakasına indirin. Uyarıcının çıkış gücünü orta bir seviyeye getirin.Uyaran izolatörü yaklaşık 150 mikroamper değerine ayarlanır. Bir uyaran artefaktı kaydedilene kadar uyaran elektrodu küçük aralıklarla yavaşça indirin. CA1'de, CA1 yanıtları alınırken hem uyaran hem de kayıt elektrotlarını aralıklarla yavaşça indirmeye devam edin.Clamp X gibi bir yazılım edinme programı kullanarak, fiber volley ve eksitatör postsinaptik potansiyel amplitütleri maksimum seviyelere ulaşana kadar bir sinaptik güç eğrisi oluşturun. Ardından, çeşitli yoğunluklarda stimülasyonlar uygulamak için yazılımı kullanın ve ca one üzerinde ilgili aktiviteyi kaydedin. Kullanılan stimülasyon yoğunluk seviyelerinin aralığı ve sayısı, FV veya EPSP değerlerine karşı grafiğe döküldüğünde sigmoidal bir eğri oluşturmaya yetecek düzeyde olmalıdır.Ardından sinaptik plastisiteyi araştırmak için, her dilimden bir milivolt yanıt alınacak şekilde stimülasyon şiddetini yeniden ayarlayın. Bazal stimülasyona 0,033 hertz EPSP frekansında başlayın. Eğim değerleri, uzun süreli potansiyasyon LTP veya uzun süreli depresyon LTD indüksiyonundan önce en az 20 dakika boyunca stabil olmalıdır.Bazal dönemi kaydetmek için, her 30 saniyede bir stimülasyon uygulamak ve kayıt almak amacıyla bir clamp X parametre dosyası kullanın. Ardından LTP'yi indüklemek için, 100 hertz stimülasyonun bir saniyelik bir serisini veya LTD indüksiyonu için her 200 milisaniyede bir verilen 200 hertz stimülasyonun çoklu kısa patlamalarını içeren ayrı bir parametre dosyası açın. Bir hertz hızında 900 stimülasyon pulsu uygulayın.Stimülasyon dizileri tamamlandıktan sonra temel parametre dosyasına geri dönün ve 60 dakika veya daha fazla süre boyunca sinaptik yanıtları toplayın. Sinaptik güçteki artışla belirtilen LTP veya sinaptik güçteki azalmayla belirtilen LTD'nin varlığını belirlemek için yüksek ve düşük frekanslı stimülasyondan önce ve 60 dakika sonra elde edilen EPSP eğim değerlerini karşılaştırın. Her iki sürecin de öğrenme ve bellek için kritik mekanizmaları yansıttığı yaygın olarak kabul edilmektedir.Burada, iki farklı APP PS.One faresinden alınan iki farklı hipokampal kesite ait temsili sinaptik güç eğrileri gösterilmektedir. Farelerden biri yeni bir anti-inflamatuar adeno-ilişkili viral reaktif ile tedavi edilmiştir. Diğeri ise kontrollü bir viral reaktif ile tedavi edilmiştir.Benzer sayıda presinaptik fiberin farklı tedavi koşullarında aktive edildiği görüldüğünde; gruplar x ekseninde belirtilen benzer FV amplitüdlerini gösterdiğinde, reaktif a dilim eğrisi sola kayarak daha yüksek EPSP amplitüdlerine işaret eder. Bu veriler, gösterilen reaktif a ile tedavi edilmiş dilimde bazal sinaptik gücün daha fazla olduğunu kanıtlamaktadır.Aynı dilimler üzerinde gerçekleştirilen LTP deneylerinin sonuçları burada sunulmuştur. 100 hertz stimülasyonu uygulandıktan sonraki bir saatlik baz hattı süresince, reaktif a dilimindeki EPSP eğim değerlerinin kontrol dilimine göre çok daha yüksek olduğu görülmektedir; bu durum, LTP'nin reaktif a diliminde mevcut olduğunu ancak kontrol diliminde olmadığını göstermektedir. Bu şekil, 100 hertz stimülasyonu öncesinde ve uygulamanın 60 dakika sonrasında reaktif A ve kontrol fare dilimlerindeki EPSP dalga formlarının nasıl göründüğünü göstermektedir.100 hertz sonrası dönemdeki EPSP eğimindeki artış, reaktif A diliminde LTP'yi birlikte belirten çok belirgin bir durumdur. Şimdiye kadar gösterilen şekillerdeki deneyler, reaktif A'nın sinaptik gücü artırdığını ve LTP eksikliklerini iyileştirdiğini göstermektedir. PP PS bir farelerde yapılan benzer deneyler, yaşlı sıçanların hipokampal LACS'leri üzerinde gerçekleştirilmiştir.Burada, yeni bir anti-inflamatuar ilaç ile tedavi edilen bir sıçandan ve kontrol taşıyıcı reajeni ile tedavi edilen bir başka sıçandan alınan iki farklı hipokampal kesite ait sinaptik güç eğrileri gösterilmektedir. Bu eğrilerin iki kesit için birbirine çok benzer olduğunun, bunun da ilaç A'nın bazal sinaptik güç üzerinde çok az etkisinin olduğunun belirtilmesine dikkat ediniz. Bu şekil, aynı kesitler üzerinde gerçekleştirilen LTD deneylerinden elde edilen sonuçları göstermektedir.Yaşlı sıçanlar için tipik olan durum, araç (vehicle) ile işlem görmüş dilimdeki EPSP eğim değerlerinin, 1 Hz stimülasyonu sonrası birinci saatlik bazal dönemde baskılanmış olmasıdır. Ancak, ilaç A uygulanan dilimdeki EPSP eğim değerleri çok az baskılanma göstermekte veya hiç göstermemekte olup bu durum LTD'nin yokluğunu belirtmektedir; burada ilaç A ve araç uygulanan sıçan dilimlerinden alınan, 1 Hz stimülasyonu öncesi ve 60 dakika sonrasına ait EPSP dalga formları gösterilmiştir. 1 Hz sonrası dönemdeki EPSP eğimindeki azalma, araç uygulanan dilimde oldukça belirginken, ilaç A uygulanan dilimde görülmemektedir.Bu şekillerdeki sonuçlar, ilaç a'nın yaşlı sıçanlarda LTD indüksiyonunu engelleyerek plastisite farklılıklarını iyileştirdiğini, ancak bazal sinaptik fonksiyonu etkilemediğini göstermektedir. Bu veriler, yaşlı sıçanlar ve Alzheimer model farelerinde sinaptik fonksiyon ve plastisitenin çok sayıda parametresinin deneysel tedavilerle modüle edilebileceğini göstermekte ve yeni deneysel ilaçların ve reaktiflerin nootropik ve/veya nöroprotektif potansiyellerini araştırmak için akut hipokampal dilimlerin faydasını vurgulamaktadır. Bu prosedürü uygularken, beyni çıkarma hızınız ile elektrofizyolojik ölçümler için hipokampusu disseke etme, dilimleme ve taşıma sırasındaki hassasiyetiniz ve nazikliğiniz arasında bir denge kurmayı hatırlamanız önemlidir.

preparation-acute-hippocampal-slices-from-rats-transgenic-mice-for

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Alzheimer hastalığının bir özelliği Aβ yükseklik.

Β-amiloid Oligomerik hazırlanması 1-42</subHipokampal Dilimleri Sinaptik Plastisite değer düşüklüğü> İndüksiyon

Kaynak: McLeod, F.,  et al. Hipokampal Kemirgen Beyin Dilimlerinde Sinaps Yoğunluğunun Değerlendirilmesi. J. Vis. Uzm. (2017). Bu video, konfokal immünofloresan analizi kullanarak hipokampal beyin dilimlerinde sinaptik belirteçleri görselleştirmek için bir yöntemi göstermektedir. Dilimler, presinaptik ve postsinaptik belirteçleri hedef alan primer antikorlarla immün boyanır, ardından florofor konjuge sekonder antikorlar gelir. Etiketli belirteçler daha sonra sinaptik mimariyi kolokalizasyonları...

İmmünofloresan Kullanılarak Fare Hipokampal Dilimlerinde Sinapsların Mikroskobik Analizi

Bu makale hazırlamak ve korumak için tam bir metodoloji...

Uzun vadeli potansiyelize bir çok Kararlı ve tekrarlanabilir Kayıt için geliştirilmiş Hazırlık ve Hipokampal Fare Dilimleri korunması

Bu video makalesinde, kemirgenlerden alınan akut hipokampal dilimler kullanılarak CA1 piramidal nöronlarında sinaptik etiketleme, yakalama ve çapraz etiketleme gibi uzun vadeli plastisiteyi ve ilişkisel süreçlerini incelemek için deneysel prosedürler açıklanmaktadır.

Kemirgenler gelen akut Hipokampal Dilimleri kullanarak Synaptic Etiketleme / yakalama ve Çapraz yakalama İncelenmesi

Bu iletişim kuralı bir en iyi duruma getirilmiş Nuygulanmasını gösteren-metil-D-glucamine (NMDG) koruyucu kurtarma yöntemi beyin dilim hazırlık. Bir tek medya formülasyon güvenilir bir şekilde sağlıklı beyin dilimleri her yaştan ve çeşitli deneysel uygulamalar için hayvanlardan elde etmek için kullanılır.

En iyi duruma getirilmiş bir Nkullanarak akut beyin dilimleri hazırlanması-metil-D-glucamine koruyucu kurtarma yöntemi

Bu iletişim kuralı oksijen seviyesini geri dönüşümlü arabellek küçük bir hacim ve etkinlik bağımlı sinaptik plastisite batık akut Hipokampal dilimler halinde kayıt metodolojik açıdan istikrar açıklar.

Sinaptik plastisite akut Hipokampal dilimleri bir küçük hacimli geri dönüşüm-, perfüzyon- ve batma-tipi oda sistemi içinde tutulan kayıt

Doğru bir şekilde belirlenmesi ve Hipokampal dilimleri ayirt kullanarak sinapslarda analiz için bir protokol bu makalesinde ana hatlarıyla.

Hipokampal kemirgen beyin dilimleri dansitesi Synapse değerlendirilmesi

Bu doku hipoksik hasarı azaltmak için buz gibi NMDG-aCSF ile transkardiyal perfüzyon ve dilim kesme yararlanır yetişkin ve yaşlanma fare hipokampi akut dilim hazırlanması için bir protokoldür. Elde edilen dilimler saatlerce sağlıklı kalır ve uzun süreli yama kıskaçları ve alan kayıtları için uygundur.

Yetişkin ve Yaşlanan Farelerden Hipokampal Dilimlerde Hipoksinin En Aza Indirilmesi

Bu makale, farelerde yatay hipokampal beyin dilimleri elde etmek için sistematik bir protokolü tanımlamayı amaçlamaktadır. Bu metodolojinin amacı, dentat girus ile ilgili nörolojik süreçleri değerlendirmek için perforant yol ve yosunlu lif yolu gibi hipokampal lif yollarının bütünlüğünü korumaktır.

Fare Beyninin Yatay Hipokampal Dilimleri

Farelerin dorsal-ara hipokampusundan akut dilimler hazırlamak için bir protokol sunuyoruz. Bu transversal preparatı, kayıtların kalitesi ve kaydedilen nöronların morfolojik özelliklerinin korunması açısından koronal dilimleme ile karşılaştırıyoruz.

Yetişkin Farelerin Dentat Girusunda Tüm Hücre Kaydı ve Nöronal Rekonstrüksiyon için Dorsal Hipokampustan Akut Dilimlerin Hazırlanması

Keşfedin yaşlı sıçan ve transgenik farelerde hipokampal dilim hazırlama yöntemini. Bu protokol sinaptik fonksiyon ve plastisite değişikliklerini inceleyerek yaşlanma ve amiloid patolojisinin bilişsel düşüş üzerindeki etkilerini anlamaya yardımcı olur.

Yaşlanma ve Amiloid Patoloji sırasında sinaptik değişiklikler Çalışması Sıçanlar ve Transgenik Farelerde akut Hipokampal Dilimleri hazırlanması (Video) | JoVE Journal

Yaşlanma ve Amiloid Patoloji sırasında sinaptik değişiklikler Çalışması Sıçanlar ve Transgenik Farelerde akut Hipokampal Dilimleri hazırlanması

Daha fazla video keşfet