JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 1:27 dk. • March 4th, 2025
Nöronların lipofusin granülleri içerdiği önceden eklenmiş kortikal doku ile başlayın. Bu lipid açısından zengin granüller yaşlanma ile birikir ve nöropatolojik durumlarla ilişkilidir.
Lipofuscin de dahil olmak üzere hücre yapılarını stabilize etmek için dokuyu osmiyum tetroksit ile tedavi edin.
Dokuyu kurutmak için artan konsantrasyonlarda etanol ile tedavi edin. Daha sonra reçineye gömün ve nöronal yapıları ortaya çıkarmak için ultra ince kesitler kesin.
Bölümü kaplanmamış bir bakır ızgaraya monte edin.
Bölümü, ağır metal bir leke olan uranil asetat ile boyayın.
Uranil iyonları, lipitler, proteinler ve DNA dahil olmak üzere hücresel biyomoleküllerle etkileşime girer.
Daha sonra, dokuyu önceden bağlanmış uranil iyonları ile zayıf bir şekilde etkileşime giren ve arka plana karşı kontrastı artıran kurşun sitrat ile boyayın.
Lekeli dilimi, odaklanmış bir elektron demetine maruz bırakmak için bir transmisyon elektron mikroskobu altına yerleştirin.
Ağır metal lekeleri ile zenginleştirilmiş lekeli biyomoleküller, elektronları arka plana kıyasla güçlü bir şekilde dağıtır.
Lipofuscin granülleri, daha hafif sitoplazmik arka plana karşı düzensiz, yoğun kümeler olarak görünür ve nöronlardaki
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin