JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 1:30 dk. • March 4th, 2025
Hastalığın ilerlemesi sırasında belirli zaman noktalarında otoimmün demiyelinizasyon ile indüklenen farelerden kimyasal olarak sabitlenmiş omurilik dokusu elde edin.
Hastalık, otoreaktif bağışıklık hücrelerinin miyelin proteinlerine saldırmasını tetikler ve nöronal aksonları çevreleyen miyelin kılıfını bozar.
Oligodendrosit öncü hücreleri, etkilenen bölgeye alınır, oligodendrositlere olgunlaşır ve miyelin kılıfını yeniden oluşturur.
Fazla fiksatifi çıkarmak için dokuyu bir tamponla durulayın, ardından miyelin lipidlerine bağlanan ve görüntüleme için kontrastı artıran osmiyum ile tedavi edin.
Makromoleküllere bağlanan ve kontrastı artıran ağır metal lekeleri uygulayın.
Artan alkol konsantrasyonları kullanarak dokuyu kurutun. Reçineye gömülü dokuyu alın ve ultra ince kesitler elde edin.
Elektron mikroskobu kullanarak, aksonları şişmiş, daha kalın bir kılıfla demiyeliniz, kılıfsız demiyelinize veya ince bir kılıfla remiyelinli olarak sınıflandırmak için miyelin kılıf kalınlığını ölçün.
Nörofilamentler ve şişmiş mitokondri arasındaki mesafenin azalması veya tam dejenerasyon ile karakterize aksonal hasarı tanımlayın.
Hastalığın ilerlemesini değerlendirmek için aksonal hasarın ilerlemesini ve zaman içinde onarımını analiz edin.