JoVE Encyclopedia of Experiments
Sinirbilim
0 görüntüleme • 1:20 dk • March 4th, 2025
Yaşlı bir köpekten parafine gömülü beyin dokusu bölümü içeren bir cam slaytla başlayın.
Doku, nörolojik bozuklukların temel göstergeleri olan beyin damar duvarlarında amiloid fibrilleri ve anormal protein agregatlarını gösterir.
Parafini çıkarmak için slaytı ksilene batırın, ardından ksileni ortadan kaldırmak için alkollü bir yıkama yapın.
Ardından, slaytı sırayla azalan alkol konsantrasyonuna daldırın. Bu işlem doku bölümünü nemlendirir ve boyama için geçirgenliğini arttırır.
Amiloid fibrillerin beta tabaka yapısına yüksek afinite ile bağlanan ve belirgin bir kırmızı renk sağlayan Kongo kırmızı boyası uygulayın.
Bağlanmamış boyaları çıkarmak için bölümü suyla durulayın.
Son olarak, hücre çekirdeklerini seçici olarak mavi renkte boyayan temel Hematoksilen boyasını uygulayın. Fazla lekeyi çıkarmak için yıkayın.
Mikroskop altında, serebral damar duvarlarındaki yoğun kırmızı lekeli bölgeler, serebral amiloid anjiyopatinin karakteristiği olan amiloid fibrillerin varlığını doğrular.