JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 1:21 dk. • March 4th, 2025
Hafif kronik serebral hipoperfüzyona veya MCCH'ye maruz kalan ve amiloid-beta peptitleri enjekte edilen bir fareden bir beyin dokusu kesiti alın.
MCCH, beyne giden kan akışının azalması ile karakterizedir. Bu, serebral kan damarlarının endotel hücre tabakasına oksijen ve besin tedarikini sınırlayarak hücrelere zarar verir.
Hasar, damar duvarı geçirgenliğini artırarak enjekte edilen amiloid-beta peptitlerin duvarda birikmesine ve plaklar oluşturmasına izin verir.
Kalan kimyasalları çıkarmak için bölümü bir tamponla yıkayın.
Amiloid plaklarına bağlanan floresan bir boya olan thioflavin S ile inkübe edin.
Bağlanmamış boyayı çıkarmak ve dokuyu yeniden sulandırmak için lekeli kısmı azalan alkol konsantrasyonlarıyla yıkayın.
Hidrasyonu korumak için bölümü tampona yerleştirin.
Boyanın floresan yoğunluğunu koruyan bir montaj ortamı kullanarak bölümü monte edin.
Bir floresan mikroskobu altında, MCCH'nin neden olduğu amiloid-beta agregasyonunu doğrulamak için floresan etiketli amiloid birikintilerinin varlığını inceleyin.