JoVE Encyclopedia of Experiments
Sinirbilim
0 görüntüleme • 1:20 dk • March 4th, 2025
İstenilen oranda nöral kök hücreleri veya NSC'leri ve beyin mikrovasküler endotel hücrelerini veya BMEC'leri alın.
Hücre karışımını hücre dışı bir matris veya ECM çözeltisi içinde süspanse edin.
Karışımı konfokal bir kabın dibine yayın ve inkübe edin.
ECM polimerize olur ve hücresel yapışmayı sağlayan üç boyutlu bir iskele oluşturur.
ECM çözeltisinde katılaşmış katmanın üzerine bir NSC tabakası yayın.
ECM'yi polimerize etmek için inkübe edin. Bu, katmanlı beyin dokusunu taklit ederek hücre-hücre etkileşimlerini geliştirir.
Medya ekleyin ve kuluçkaya yatırın.
Ortamdaki büyüme faktörleri, BMEC'lerin vasküler benzeri ağlar halinde organize olmasını ve bir nörovasküler ünite veya NVU oluşturmasını kolaylaştırırken hücre proliferasyonunu teşvik eder.
Ortamı A vitamini içeren ortamla değiştirin, bu da NSC'lerin nöronlara ve glial hücrelere farklılaşmasını kolaylaştırır.
NVU içindeki hücreler, beyin benzeri bir mikro ortamı kopyalayan modüler bir organizasyonda kendiliğinden bir araya getirilir.