JoVE Encyclopedia of Experiments
Sinirbilim
0 görüntüleme • 1:29 dk • March 4th, 2025
Alzheimer hastalığının dişi fare modelinden elde edilen kimyasal olarak sabitlenmiş beyin bölümlerini ele alalım.
Bu bölümler, hipokampal nöronlarda bulunan tau proteininin anormal agregatları olan nörofibriler yumaklar içerir.
Bölümleri tampon ile yıkayın, ardından deiyonize su ile yıkayın.
Agregalarla ilişkili glikosil gruplarını oksitlemek ve aldehit grupları oluşturmak için periyodik asit ile muamele edin.
Deiyonize su ile yıkayın ve alkali bir gümüş iyodür çözeltisi ekleyin. Gümüş iyonları aldehitlerle kompleksler oluşturarak çekirdeklenme bölgeleri oluşturur.
Bağlanmamış gümüşü çıkarmak ve pH'ı nötralize etmek için seyreltik zayıf bir asitle yıkayın.
Deiyonize su ile durulayın.
Gümüş iyonlarını metalik gümüşe dönüştürmek ve soluk kahverengi bir renk elde etmek için bir indirgeyici madde içeren soğutulmuş bir geliştirici solüsyonu ekleyin.
Gelişimi durdurmak için seyreltik zayıf bir asitle durulayın.
Bölümleri monte edin, artan alkol konsantrasyonları kullanarak kurutun ve bir montaj ortamı uygulayın.
Bölümleri bir lamel ile kapatın.
Bir ışık mikroskobu kullanarak, nörofibriler yumakları görselleştirin.