JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 1:27 dk. • March 4th, 2025
Optik siniri, yaralanma sonrası belirli aralıklarla beyin yaralanması olan transgenik farelerden izole edin. Sinir, bir floresan proteini ifade eden nöronlar içerir.
Floresan mikroskobu kullanarak, aksonal şişliklerde ve bağlantı kopmalarında ilerleyici bir artış gösteren yaralı siniri görselleştirin.
Hücresel yapıları korumak için dokuyu sabitleyin.
Fazla fiksatifi çıkarmak için dokuyu durulayın.
Miyelin kılıf lipidlerine bağlanan ve görüntüleme için kontrastı artıran bir osmiyum-ferrosiyanür çözeltisi ile tedavi edin.
Dokuyu durulayın, ardından makromoleküllere bağlanan ve kontrastı artıran ağır bir metal bileşiği içinde inkübe edin.
Artan alkol konsantrasyonları kullanarak dokuyu kurutun ve bir reçineye gömün.
Enine ve boyuna kesitler elde edin ve bunları ağır metal bileşikleri ile işleyerek kontrastı iyileştirin.
Bir elektron mikroskobu altında, uzunlamasına kesitler, birikmiş şişmiş mitokondri, veziküller, zar kanaması ve bozulmuş hücre iskeleti yapıları ile aksonal şişliklerin ilerleyici bir gelişimini ortaya çıkarır.
Enine kesitler, aksonal dejenerasyonu gösteren miyelin kılıflarının ilerleyici bir bozulmasını gösterir.