JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 1:17 dk. • March 4th, 2025
Bir glikozaminoglikan olan heparan sülfat, Alzheimer hastalığı ile ilişkili amiloid plaklarında bulunur.
Heparan sülfatı görselleştirmek için, amiloid plakları içeren hastalıklı bir insan hipokampal doku bölümü ile başlayın.
Hücresel yapıları korumak için bir fiksatif kullanarak doku bölümünü sabitleyin.
Daha sonra, spesifik olmayan antikor bağlanmasını önlemek için dokuyu bir bloke edici madde ile tedavi edin.
Hücresel zarları geçirgen hale getirmek için iyonik olmayan bir deterjan ekleyin.
Dokuyu, amiloid plakları içinde özellikle heparan sülfatı hedef alan birincil antikorlarla inkübe edin.
Bağlanmamış primer antikorları yıkayın.
Daha sonra, heparan sülfata bağlı birincil antikorlara bağlanan florofor konjuge ikincil antikorları ekleyin.
Bağlanmamış antikorları çıkarın.
Floresan bir boya kullanarak çekirdekleri boyayın.
Son olarak, amiloid plakları içindeki floresan etiketli heparan sülfatı ve hastalıklı doku bölümündeki mavi renkli çekirdekleri görselleştirmek için bir floresan mikroskobu kullanın.