JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 1:23 dk. • March 4th, 2025
Kronik strese maruz kalan bir fareden kimyasal olarak sabitlenmiş bir beyin alın.
Stres, duyguları düzenleyen bir beyin bölgesi olan medial prefrontal korteksteki nöronal aksonları çevreleyen lipid açısından zengin miyelin kılıfını bozarak oligodendrosit fonksiyonunu bozar.
Doku mimarisini korumak için sabitleyiciyi yeniden uygulayın. Suyu değiştirmek için dokuyu bir kriyoprotektan içine daldırın ve donma sırasında buz kristali oluşumunu önleyin.
Beyni dondurun, ardından koronal dilimlere ayırın.
Dilimleri slaytlara monte edin, ardından leke penetrasyonunu artırmak için suda yeniden sulandırın.
Dilimleri altın iyonları içeren bir çözelti içinde ısıtın. Bu iyonlar, miyelin kılıfındaki lipitlere seçici olarak bağlanır ve miyelinli nöronları etiketleyerek metalik altın birikintileri oluşturur.
Fazla altın iyonlarını azaltmak için bir indirgeyici madde ile ısıtın, daha sonra bunları çıkarmak için durulayın ve artan alkol konsantrasyonları kullanarak dokuyu kurutun.
Doku şeffaflığını artırmak ve slaytları monte etmek için ksilen kullanın.
Mikroskopi kullanarak, altın lekeli miyelinli nöronları görselleştirin ve strese bağlı değişiklikleri değerlendirin.