JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 2:30 dk. • August 29th, 2025
Bakteriyel Legionella pneumophila dış zar veziküllerine veya OMV'lere maruz kalan önceden işlenmiş makrofajları içeren çok kuyulu bir plaka ile başlayın.
OMV ile tedavi edilen makrofajları enfekte etmek için tanımlanmış bir bakteri-konak hücre oranında Legionella pneumophila ekleyin.
Kuluçka sırasında, makrofajlar zara bağlı fagozomlar içindeki bakterileri içselleştirir.
OMV ön işlemi, makrofaj sinyalini değiştirerek fagozom olgunlaşmasını engeller.
Bu, bakterileri koruyan ve hücre içi replikasyona izin veren Lejyonella içeren bir vakuol oluşumunu kolaylaştırır.
Bir deterjan ekleyin ve makrofajları parçalamak için inkübe edin. Bu, hücre içi bakterileri ortama salar.
Seyreltilmiş lizatı besin açısından zenginleştirilmiş bir agar plakasına sürün.
Kuluçka sırasında bakteriler büyür ve görünür koloniler oluşturur.
Canlı bakteri sayısını temsil eden koloni oluşturan birimleri veya CFU'ları belirlemek için kolonileri sayın.
OMV ile tedavi edilen ve tedavi edilmeyen makrofajlar arasındaki CFU sayımlarını karşılaştırın.
OMV ile tedavi edilen makrofajlara kıyasla daha yüksek bir CFU, OMV'lerin makrofajlar içinde Lejyonella sağkalımını kolaylaştırdığını gösterir.
Önceden işlenmiş veya işlenmemiş THP-1
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin