JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 3:06 dk. • September 26th, 2025
Besin açısından zengin bir ortamda yetiştirilen Mycobacterium tuberculosis kolonilerini içeren bir agar plakası ile başlayın.
Tek bir koloniyi besin takviyeli bir et suyuna aşılayın ve düzgün büyüme için çalkalama ile inkübe edin.
Kültürün, hücrelerin metabolik olarak aktif olduğu geç logaritmik faza ulaşmasına izin verin.
Zenginleştirilmiş bir agar plakasına küçük bir hacim pipetleyin, eşit şekilde yayın ve sürekli bir bakteri tabakası oluşana kadar inkübe edin.
Steril bir çubuğu düşük demirli minimal bir ortamla (LIMM) nemlendirin ve bakterileri toplayın.
Demir kontaminasyonunu önlemek için bunları LIMM içeren plastik bir kapta askıya alın.
Topaklanmayı önlemek için bir dispersiyon maddesi ekleyin ve çalkalamadan inkübe edin.
Demir sınırlayıcı koşullar altında, bakteriler stres tepkilerini aktive eder ve sitoplazmada sideroforlar üretir.
Bunlar hücre dışı veziküller halinde paketlenir ve çevreye salınır.
Sideroforlar demiri yakalar ve bakterilerin hayatta kalmasına yardımcı olur.
Bu sistem, mikobakteriyel adaptasyonu ve demirle sınırlı koşullar altında hayatta kalmayı vurgular
ADN zenginleştirmesi ile desteklenmiş iki mililitre mikobakteriyel et suyu ortamında tek bir MTB kolonisini aşılayı
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin