JoVE Encyclopedia of Experiments
Mikrobiyoloji
0 görüntüleme • 3:22 dk • September 26th, 2025
Karanlık bir odada LED monteli bir tutucu ile donatılmış küçük bir pencerenin üzerine yerleştirilmiş ipliksi bir siyanobakteri kültürü içeren bir tabakla başlayın.
LED, çanağı aşağıdan aydınlatarak küçük bir ışık bölgesi oluşturur.
İnkübasyon sırasında, ipliksi siyanobakteriler aydınlatılmış merkeze doğru göç ederek fototaksi gösterir.
Zamanla, siyanobakteriler göç eder ve aydınlatılmış merkezde birikerek gözle görülür şekilde yoğun bir bakteri bölgesi oluşturur.
İnkübasyondan sonra, kontrastı artırmak için tabağın altına beyaz bir kağıt yerleştirin.
Aydınlatılan alanın görüntüsünü yakalayın ve yazılım kullanarak analiz edin.
Bir piksel yoğunluk profili oluşturmak için bakteri bölgesinin merkezinden geçen çanak boyunca bir çizgi çizin.
Bakteri bölgesinin dışındaki ve içindeki ortalama piksel yoğunluğunu karşılaştırın.
Daha sonra, siyanobakteriyel fototaksiyi temsil eden bakteri bölgesinin çapını belirlemek için merkezi bölge içinde maksimum yoğunlukta bir çizgi çizin.
Aşağıdan yukarıya 20 milimetre karelik bir alanı ışınlamak için beş milimetrelik LED'lerin monte edildiği LED tutucular hazırlayın. LED yoğunluklarını ölçün ve ayarlayın. Tüm ortamın karanlık bir odada veya kapalı, karanlık bir kapta olduğundan emin olun.
P. lacuna içeren ortamın sekiz mililitresini altı santimetrelik bir Petri kabına yerleştirin, Petri kabını kapakla kapatın ve LED Petri kabının ortasında olacak şekilde bir LED tutucunun üzerine yerleştirin. Tipik olarak iki gün sonra, doğrudan ışık tedavisinin konumuna yönelik bir akıllı telefon kamerasıyla Petri kabının bir görüntüsünü yakalayın. Her resim için aynı mesafeyi ve ışık koşullarını sağlamak için arka plan olarak bir tutucu ve beyaz bir sayfa kullanın.
ImageJ yazılımını açın, Dosya, Aç'a tıklayın ve dosyayı seçin. Ardından, Enter'a tıklayın. Düz düğmeyi seçin ve Petri kabının bir ucundan diğer ucuna bir çizgi çizmek için farenin sol düğmesine basın.
Çizginin filament çemberinin merkezinden geçtiğinden emin olun. Petri kabının uzunluğunu görmek için Analiz Et ve Ölç'e tıklayın. Ardından, ImageJ menüsünde Profili Analiz Et ve Çiz'e tıklayın.
Dairenin dışındaki piksel yoğunluğu için bir ortalama değer ve dairenin içindeki piksel yoğunluğu için başka bir ortalama değer tahmin edin. Dairenin her iki tarafının X değerlerini tahmin etmek için fareyi bu değerler arasındaki Y konumuna getirin. Her iki değeri de not edin ve farkı hesaplayın.
Ardından düz düğmeyi seçin ve piksel yoğunluğunun orta-maksimum değerinde bir çizgi çizin. Son olarak, iç hücre dairesinin uzunluğunu elde etmek için Analiz Et'e ve ardından Ölç'e tıklayın.
Bu çalışma, kontrollü bir ışık ortamı kullanarak filamentli siyanobakterilerin fototaktik davranışlarını incelemektedir. Metodoloji, siyanobakterilerin aydınlatılmış bir alana doğru göçünün ölçülmesini kapsamakta ve onların fototaktik tepkileri hakkında bilgi sağlamaktadır.
Bu analiz, fotosentetik mikroorganizma araştırmalarında hedef doğrulamayı destekleyerek, mikrobiyal fototaktik davranışın kantitatif ölçümüne olanak tanır. Işık yönlü göçü değerlendirmek için tekrarlanabilir bir yöntem sunarak, biyoproduksiyon uygulamaları için siyanobakteriyel suş seçiminin mekanistik risklerinin azaltılmasına yardımcı olur. Bu yaklaşım, erken keşif iş akışlarında genetik veya çevresel modifikasyonların fonksiyonel fenotipik çıktılarla ilişkilendirilmesinde öngörülebilir bir güven sağlar.
Bu analiz, fotosentetik mikroorganizma mühendisliği için fenotipik bir tarama aracı sağlayarak, erken keşiften preklinik çalışmalara kadar olan iş akışlarına uygundur.
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
Son güncelleme: 29 Ağustos 2026