JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 2:39 dk. • September 26th, 2025
Biyomateryalle ilişkili enfeksiyonu in vivo olarak modellemek için floresan etiketli patojenik bakterilerle enjekte edilen anestezi uygulanmış zebra balığı embriyolarıyla başlayın.
Uygun filtrelerle donatılmış bir stereo floresan mikroskobun sahnesine anestezik içeren bazal ortam içeren bir Petri kabı yerleştirin.
Embriyoları görüntüleme için hareketsiz hale getiren viskoz bir ortam oluşturmak için tabağa metilselüloz çözeltisi ekleyin.
Tek tek embriyoları metilselüloza aktarın ve enjeksiyon bölgesinin görünür olduğundan emin olarak yatay olarak hizalayın.
Parlak alan filtresini kullanarak, enfekte bölgeyi hedeflemek için enjeksiyon bölgesine odaklanın.
Enfeksiyon dinamiklerini üç boyutlu olarak yakalamak için Z-yığını görüntüleme parametrelerini ayarlayın ve farklı derinliklerde floresan görüntüler elde edin.
Yazılım kullanarak, floresan yoğunluğunu ölçmek ve bakteri dağılımını izlemek için zaman içinde yakalanan görüntüleri analiz edin.
Bu protokol, biyomateryale maruz kalan ve olmayan canlı embriyolarda enfeksiyon ilerlemesinin doğrudan karşılaştırılmasını sağlar.
Stereo floresan mikroskop aşamasına %0,02 trikain ile desteklenmiş E3 ortamı içeren 100 milimetrelik bir Petri kabı yerleşti
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin