JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 2:30 dk. • September 26th, 2025
Metabolik olarak aktif bir Mycobacterium marinum kültürü alın.Bu, yüksek bakteri canlılığı ve optimal fizyolojik durum sağlar.
Bakterileri peletlemek için kültürü santrifüjleyin.
Fazla süpernatanı atın ve peleti bir dispersiyon maddesi içeren taze ortamda yeniden süspanse edin.
Süspansiyonu mikrosantrifüj tüplerine aktarın ve kontrollü koşullar altında sonikasyon yapın.
Sonikasyon, bakteri agregatlarını bozar ve hücreleri dağıtır, bu da canlı bir tek hücreli süspansiyon ile sonuçlanır.
Sonikasyonlu süspansiyonu bir şırıngada toplayın ve kalan kümeleri çıkarmak için bir membran filtreden geçirerek tek tip bir tek hücreli popülasyon sağlayın.
Bir spektrofotometre kullanarak bakteri süspansiyonunun optik yoğunluğunu ölçün.
Hücre canlılığını korurken istenen bakteri konsantrasyonuna ulaşmak için süspansiyonu taze kriyoprotektan içeren ortamla seyreltin.
Son tek hücreli süspansiyonu ayırın ve ultra düşük sıcaklıklarda saklayın. Kriyoprotektan uzun süreli depolama sırasında bakteri canlılığının korunmasına yardımcı olur.
El yazmasına göre aşılamadan sonra, Mycobacterium marinum'u bir pelet olarak toplamak için kültürü 3000 kez G'de 10 dakika santrifüjleyin. Süpernatantın 300 mikrolitresi hariç he
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin