Streptomyces venezuelae Yaşam Döngüsünün Floresan Hızlandırılmış Görüntülemesi
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 5:46 dk. • September 26th, 2025
Hif oluşturan bir bakteri olan Streptomyces venezuelae sporlarını içeren bir kuyuya sahip mikroakışkan bir plaka alın.
Belirlenen diğer kuyular ya besin açısından zengin ya da kullanılmış ortam içerir.
Sporlar, sırasıyla hif uçlarda ve çapraz duvarlarda lokalize olan floresan DivIVA ve FtsZ proteinlerini eksprese eden bir suştan türetilir.
Ters çevrilmiş bir mikroskobun objektif merceğine ve plakanın görüntüleme penceresine daldırma yağı uygulayın.
Plakayı mikroskop tablasına monte edin ve hızlandırılmış görüntülemeye başlayın.
Sporları plakanın kültür odasına yükleyin.
Daha sonra spor çimlenmesini başlatmak için besin açısından zengin ortamı ekleyin.
Hifler büyüdükçe, DivIVA hif uçlarında birikirken, FtsZ çapraz duvarlarda dağınık halkalar oluşturur.
Ardından, harcanan ortama geçin. Bu ortamdaki besin eksikliği sporülasyonu destekler.
Filizlenen hiflerde, DivIVA odakları kaybolur ve FtsZ, sporülasyon septaları oluşturarak düzenli bir bölünme halkaları merdiveni halinde yeniden düzenlenir.
Zamanla, aynı hiflerde FtsZ floresansının kaybolması, sporülasyonun tamamlandığını doğrular.
Çevre odasını önceden 30 santigrat dereceye ısıtın.
Ardından mikroskobu ve mikroskop kontrol yazılımını açın. Yüks
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin