JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 3:07 dk. • September 26th, 2025
Floresan yaymak için genetiği değiştirilmiş, hapsolmuş bakteri kolonileri içeren, ışıkla parçalanabilen bir hidrojel tabakasına sahip bir lamel alın.
Lameli bir tutucuya yerleştirin.
Numunenin dehidrasyonunu önlemek için ortam ekleyin.
Parlak alan mikroskobu altında, ilgilenilen tek bir koloniye odaklanın.
Uygun yazılımı kullanarak, hidrojelin yapısal bağlarını parçalamak ve hücrelere UV maruziyetini en aza indirmek için koloni çevresinde hücre ekstraksiyonu için bir ışık modeli tasarlayın.
UV ışık yoğunluğunu ve maruz kalma süresini ayarlayın.
Hedef koloninin salınmasını kolaylaştıran açıkta kalan alanlarda hidrojeldeki yapısal bağları kırmak için UV ışığına maruz kalmayı başlatın.
Bir floresan filtresi kullanarak koloniyi tanımlayın.
Diğer ucu bir şırıngaya bağlı olacak şekilde noktaya bir boru ucu yerleştirin.
Parlak alan moduna geçin ve şırıngayı kullanarak serbest bırakılan koloniyi aspire edin.
Daha fazla analiz için koloniyi bir tüpe aktarın.
Numuneyi bir PDMS tutucuya yerleştirin ve numunenin dehidrasyonunu önlemek ve serbest bırakılan hücreler için bir taşıyıcı çözelti sağlamak için tanımlanan ortamı numunenin üzerine ekleyin. Kalibrasyon aynasını yerine getirdikten sonra, hidrojel v
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin