Larva Zebra Balığı Bağırsağından Clostridioides difficile Bakterilerinin İzolasyonu ve Kültürü

Patojenik bir anaerobik bakteri olan Clostridioides difficile ile enfekte olmuş bir bağırsağa sahip ötenazi uygulanmış bir zebra balığı larvası ile başlayın.

Larvanın üst sırt gövdesini sabitleyin ve iç organları ortaya çıkarmak için başını çıkarın.

Orta dorsal gövdeyi sabitleyin ve bağırsağı vücut boşluğundan nazikçe izole edin.

İzole edilmiş bağırsağı tampon içeren bir mikrosantrifüj tüpüne aktarın.

Dokuyu bozmak ve bağırsak mikroplarını serbest bırakmak için bir havaneli kullanarak bağırsağı homojenize edin.

Homojenatı, antibiyotiklerle desteklenmiş seçici yetiştirme ortamı içeren bir tüpe aktarın.

Homojenatı anaerobik bir odada inkübe edin.

Anaerobik koşullar aerobik bakterilerin büyümesini engellerken, antibiyotikler özellikle doğal anaerobik bağırsak mikroplarının büyümesini hedefler ve baskılar.

Clostridioides difficile bu antibiyotiklere direnç gösterir ve anaerobik koşullar altında çoğalır.

Yetiştirme ortamındaki besinler ve büyüme faktörleri, hücre bölünmesini daha da teşvik ederek canlı Clostridioides difficile'nin büyümesini sağlar.

Enfekte zebra balığı larvalarına ötenazi yapıldıktan sonra, zebra balığını hareketsiz hale getirmek için zebra balığı larvalarının dorsal gövdesine b