JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 2:45 dk. • September 26th, 2025
Mikromekanik bir valf ile ayrılmış büyüme ve ilaç odalarına sahip mikroakışkan çipleri alın.
Vahşi tip ve TMP'ye dirençli mutant yükleyin E. coli suşları, ortamda süspanse edilmiş, basınç kullanarak büyüme odalarına yükleyin, burada Trimetoprim (TMP) test edilen antibiyotiktir.
Daha sonra, bakterilerde hücresel stresi indüklemek için ilaç odalarını düşük konsantrasyonda TMP içeren ortamlarla doldurun.
TMP'nin büyüme odalarına difüzyonuna izin vermek için mikromekanik valfi çalıştırın ve TMP'nin bakterilere girmesini sağlayın.
Çipleri ters mikroskop tablasına monte edilmiş inkübatöre yerleştirin ve hızlandırılmış görüntülemeyi başlatın.
Vahşi tip E. coli'de TMP, dihidrofolat redüktaz enzimine bağlanarak dihidrofolat bağlanmasını önler ve stres kaynaklı filamentasyona ve bakteri çoğalmasının azalmasına neden olur.
Bununla birlikte, mutant suşun değiştirilmiş DHFR yapısı, TMP bağlanmasını önleyerek normal çoğalmaya izin verir.
Hızlandırılmış görüntüleri gözlemleyin.
Vahşi tip E. coli , TMP tedavisi altında filamentasyon ve azaltılmış çoğalma sergilerken, mutant suş, antibiyotik direncini gösteren normal morfoloji ve çoğalma sergiler.
Günlük dondurulmuş numuneyi oda sıcaklığında beş dakika çözd
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin