Mikrodizi taraması ile bakteri kovucu polimerlerin yüksek verimli tanımlanması

Çok kuyulu bir plakaya birden fazla polimer lekesi olan sterilize edilmiş, agaroz kaplı bir mikrodizi slaytı yerleştirin. Agaroz, spesifik olmayan bakteri bağlanmasını en aza indirir.

Slayta karışık bir bakteri kültürü ekleyin ve hafif çalkalayarak inkübe edin.

Bakteriler, uygun polimer noktalarına bağlanan farklı yapışma proteinleri salgılar ve bu da zamanla daha güçlü bakteri bağlanması ve kolonizasyonu ile sonuçlanır.

Tersine, kovucu polimerler protein adsorpsiyonuna direnir ve bakteri bağlanmasını azaltır.

Gevşek bağlı bakterileri çıkarmak için slaytı fosfat tamponlu salin veya PBS ile durulayın.

Yüzeye yapışan bakterilerin DNA'sını boyamak için DAPI ekleyin.

Slaytı PBS ile yıkayın, kurutun ve yapışkan bir lamel ile kapatın.

Dış slayt yüzeyini etanol ile sterilize edin.

Polimer lekelerini bulmak için parlak alan görüntüleri yakalayın. Ardından, polimer noktalarındaki floresansı algılamak için floresan moduna geçin.

Azalmış floresan sergileyen polimer lekeleri, minimum bakteri bağlanmasını gösterir ve bakteri kovucu polimerler olarak tanımlanır.

Mikrodiziler için aşıyı kültürledikten ve hazırladıktan sonra, metin protokolüne göre, UV ile sterilize edilmiş polimer mikrodizilerini dikdörtge