JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 3:13 dk. • September 26th, 2025
Gram pozitif bir bakteri olan Bacillus megaterium kültürünü ele alalım.
Kültürü taze ortamda seyreltin ve bakteri bölünmesini teşvik etmek için çalkalayarak inkübe edin.
Kültürü bir tüpe aktarın ve bakterileri peletlemek için santrifüjleyin.
Süpernatanı çıkarın ve protoplast lizisini önlemek için peleti ozmotik stabilizatörler içeren ortamlarda yeniden süspanse edin.
Yeniden süspanse edilen çözeltiyi bir şişeye aktarın, lizozim ekleyin ve çalkalayarak inkübe edin.
İnkübasyon sırasında lizozim, bakterilerin kalın peptidoglikan hücre duvarını bozar.
Hücre duvarı bozuldukça, bakteriler çubuk şeklindeki bir formdan sadece plazma zarı ile sınırlanan küresel cisimlere dönüşür ve protoplastlar oluşturur.
Süspansiyonu mikroskop altında görselleştirin.
Yuvarlak şekilli bakteriler protoplast oluşumunu doğrularken, şişmiş çubuk şeklindeki bakteriler eksik sindirimi gösterir.
Çözeltiyi bir tüpe aktarın ve protoplastları peletlemek için santrifüjleyin.
Süpernatanı çıkarın ve daha fazla analiz için protoplastları ozmotik stabilizatörler içeren taze ortamda yeniden süspanse edin.
Gram-pozitif B. megaterium protoplastları hazırlamak için, gece boyunca bakteri kültürünü 250 mililitrelik bir şişede 100 mililit
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin