JoVE Encyclopedia of Experiments
Mikrobiyoloji
0 görüntüleme • 2:02 dk • September 26th, 2025
Biyosensör görevi görecek şekilde genetiği değiştirilmiş bir bakteri kültürü içeren bir tüple başlayın.
Bakteriler, bir promotörün kontrolü altında kırmızı bir floresan proteini veya RFP geni içeren bir plazmit sistemi barındırır. Promotör, kurşun gibi spesifik bir analitin varlığına duyarlı bir protein tarafından bastırılır.
Bir test yüzeyini iyice silmek için etanol bazlı bir mendil kullanın ve yüzeyde bulunan analiti toplayın.
Mendilin ortasından küçük bir bölüm kesin ve tamamen bakteri kültürüne daldırın.
Analitin mendilden bakteri kültürüne difüzyonunu kolaylaştırmak için inkübe edin.
Analit bakterilere girer ve baskılayıcı proteine bağlanarak konformasyonunu değiştirir ve promotörü aktive eder.
Aktive edilmiş promotör, gen transkripsiyonunu başlatarak RFP'nin ekspresyonuna yol açar.
Test yüzeyinde analitin varlığından emin olmak için bakteriyel floresansı ölçün.
Parmak araları da dahil olmak üzere ellerin tüm yüzeylerini silmek için kurşunu çıkarmak için tasarlanmış etanol bazlı bir mendil kullanın. Mendilleri analize kadar uygun şekilde etiketlenmiş, kapatılabilir bir torbada saklayın. Test edilecek geniş yüzeyleri silmek için alkol bazlı bir mendil kullanın.
Test edilecek küçük yüzeyleri silmek için etanol ile nemlendirilmiş pamuklu bir takas kullanın. Temiz eldivenler giyerek ve alkolle temizlenmiş makas kullanarak, mendilin ortasından yaklaşık bir santimetre karelik bir bölüm kesin. Ardından, kesilen mendil parçasını veya pamuklu çubuğu doğrudan iki mililitre sensör bakterisi içeren bir kültür tüpüne yerleştirin ve et suyuna tamamen batırıldığından emin olun.