Streptomyces'te Gelişimsel Mutantların Değerlendirilmesi için Faz Kontrast Mikroskobu

İpliksi bir toprak bakterisi olan Streptomyces coelicolor'un vahşi tip ve mutant suşlarının kolonilerini içeren agar plakaları ile başlayın.

Koloni yüzeyinin üzerinde uzanan filamentler olan hava filamentlerinin açıkça görülebildiği yoğun koloni büyümesi bölgesine steril bir lamel yerleştirin.

Hava filamentlerini ve ilgili sporları lamel yüzeyine aktarmak için lamel hafifçe bastırın.

Ardından, montaj ortamı olan bir mikroskop lamı alın ve bakteri yapılarını korumak için lamel hücre tarafı aşağı bakacak şekilde monte edin.

Slaytı bir mikroskop tablasına yerleştirin, lamel üzerine bir damla daldırma yağı ekleyin ve objektifi hizalayın.

Faz kontrast mikroskobu kullanarak, hem vahşi tip hem de mutant suşlardan hava filamentlerinin görüntülerini elde edin.

Vahşi tip filamentler, eşit boyutta, düzenli aralıklı sporlar sergiler.

Buna karşılık, mutant suşlar, şişkin filamentler, düzensiz sporlar veya parçalanmış sporlar gibi kusurlar sergileyerek vahşi tip ile mutantlar arasındaki gelişimsel fenotipik farklılıkları ortaya çıkarır.

Bakteri üremesinin lamel kaldırmasını hazırlamak için, steril bir lamel almak için steril cımbız kullanın ve lameli bakteri üremesinin yoğun olduğu bir MS agar plakasına