Staphylococcus aureus'ta Yetkinliğe Bağlı DNA Alımı
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 3:13 dk. • September 26th, 2025
Antibiyotik kloramfenikol'e duyarlı bir S. aureus kültürü alın.
Bakterileri peletlemek ve süpernatanı çıkarmak için santrifüjleyin.
Peleti besin sınırlayıcı ortam içeren bir tüpe aktarın ve inkübe edin. Besin stresi, bakterinin yabancı DNA'yı içselleştirme yeteneği olan yetkinliği artırır.
Tekrar santrifüjleyin ve süpernatanı çıkarın. Peleti taze besin sınırlayıcı ortamda yeniden süspanse edin.
Ardından, kloramfenikol'e dirençli bir gen taşıyan bir S. aureus suşundan ekstrakte edilen DNA'yı ekleyin. Kuluçkaya yatırın.
DNA alım mekanizması, DNA'yı tek bir iplik halinde işler ve onu bakteri kromozomuna entegre olduğu sitoplazmaya taşır.
Süpernatanı santrifüjleyin ve çıkarın. Peleti besin açısından zengin ortamda yeniden süspanse edin.
Süspansiyonu kloramfenikol içeren erimiş, besin açısından zengin agara aktarın.
Karışımı bir tabağa dökün ve inkübe edin.
Kloramfenikol'e dirençli kolonilerin büyümesi, başarılı DNA alımını gösterir.
Alıcı hücreyi gece boyunca, beş mililitre TSB'de 37 santigrat derecede çalkalayarak kültürleyin. Ertesi sabah, 0,5 mililitre gece kültürünü 1,5 mililitrelik bir tüpe aktarın.
Hücreleri santrifüjleme ile çökeltin. Daha sonra hücreleri 10 mililitrelik bir tüpte 2 milili
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin