C. elegans Knockdown'ların Taranması için Çok Kuyulu Sıvı Bazlı Bir Test

0 views • 2:35 min • September 26th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bir C. elegans genini hedef alan gene özgü bir ek olsun veya olmasın, RNAi bakterileri ile önceden beneklenmiş agar ortamı içeren çok oyuklu bir plaka alın.

Tohum, L1 aşamasındaki solucanları kuyucuklara senkronize etti ve RNAi bakterileri üzerinde beslenmeye izin vermek için onları inkübe etti.

Ek parça, spesifik solucan genlerini hedef alan ve gene özgü bir yıkım fenotipi oluşturan girişim yapan RNA üretir.

Kuyucuklara tampon ekleyin ve solucanları yavaşça yeniden askıya alın.

Süspansiyonu derin kuyulu bir plakaya aktarın ve solucanların yerçekimi ile yerleşmesine izin verin.

Bir miktar tampon tutarak süpernatanı çıkarın.

Solucanları tamponla yıkayın, ardından az miktarda tampon bırakarak süpernatanı atın.

Ardından, patojenik bakteriler içeren çok kuyulu bir tahlil plakası alın.

Konakçı-patojen etkileşimlerini mümkün kılmak için belirli sayıda kontrol ve yıkım solucanını ilgili kuyucuklarına dağıtın. Patojenik bakteriler, solucan ölümüne neden olan bileşikler salgılar.

Gene özgü yıkımın solucanın hayatta kalması üzerindeki etkisini değerlendirmek için solucan ölümlerini karşılaştırın.

Kuyu başına 300 solucan içeren 24 oyuklu bir plakanın kuyucuğu başına bir mililitre S Bazal ekleyin. Plakayı sallayarak solucanları hafifçe çalkalayın, ardından solucanları boş, steril 24 derin kuyucuklu bir plakaya aktarın.

Solucanların yerçekimsel olarak yaklaşık beş dakika yerleşmesine izin verin. Süpernatanı aspire edin, kuyucuk başına yaklaşık bir mililitre bırakın, Ardından her kuyucuğa 7 mililitre S Bazal ekleyin. Yıkamayı iki kez daha tekrarlayın ve son yıkamadan sonra yaklaşık 400 mikrolitre süpernatant dışında hepsini aspire edin.

Açlığı önlemek için bakterileri 384 oyuklu plakalara pipetledikten sonra, solucan ayırıcının yeniden örnekleyici işlevini kullanarak, 22 solucanı 384 oyuklu bir plakanın her bir kuyucuğuna ayırın. Son olarak, sıralamanın ardından küçük moleküller veya diğer deneye özel malzemeleri ekleyin.

11:31

Modüle c-di-GMP sinyal İşte Küçük Moleküller Tarama için Yüksek verim Kur kurulması Pseudomonas aeruginosa

Related Videos

0 Views

11:58

Nematot Caenorhabditis Elegans - konak-mikrop etkileşimleri çalışmaya çok yönlü Vivo içinde manken

Related Videos

0 Views

11:40

Caenorhabditis elegans Health Üzerinde Etkisi Olan Mikrobiyal İzolatların Yüksek Verimli Taraması

Related Videos

0 Views

14:53

Floresan ile yüksek verim Tarama ve Biyoalgılayıcı C. elegans Suşlarının

Related Videos

0 Views

09:40

Içinde Postembryonic Fenotiplerin Belirleme RNAi Tarama C. elegans

Related Videos

0 Views

10:58

Nicel ve Otomatik Yüksek throughput Genom çapında RNAi Ekranlar C. elegans

Related Videos

0 Views

03:15

Sıvı Kültürde RNAi Besleme: C. elegans'ta Gen Ekspresyonunu Yıkmak İçin Yüksek Verimli Bir Yöntem

Related Videos

0 Views

06:28

C. elegans Kemotaksis Deneyi

Related Videos

0 Views

18:38

Büyük ölçekli Gen demonte olarak C. elegans Sağlam Kayıp fonksiyon-fenotipleri oluşturmak için DsRNA Besleme Kitaplıklar kullanma

Related Videos

0 Views

11:43

Bir taranabilir İn Vivo Transjenik biyolojik olarak ışık veren kullanarak Mitokondriyal Modülatörleri için tahlil Caenorhabditis elegans

Related Videos

0 Views

Last updated: 18 July 2026