JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 3:27 dk. • September 26th, 2025
Bir antibiyotikle ön işleme tabi tutulmuş bir E. coli kültürü ile başlayın.
Bu antibiyotik hücre bölünmesini bloke ederek DNA içeriği artmış uzun ipliksi hücrelerin oluşumuna neden olur.
Kültürün bir kısmını besin açısından zengin bir agar plakasına koyun ve inkübe edin.
İpliksi hücreler sürekli büyümeye rağmen bölünmezler; Sadece ipliksi olmayan hücreler koloniler oluşturur ve bu da düşük koloni sayılarına neden olur.
Kalan bakteri kültürünü seyreltin ve floresan DNA bağlayıcı bir boya ekleyin. Daha sonra karanlıkta kuluçkaya yatırın.
Boya hücrelere girer ve DNA'ya bağlanır.
Numuneyi vorteksleyin ve ardından bir akış sitometresinden geçirin.
Her hücreden saçılan ışık miktarı, boyutuna karşılık gelir.
Benzer şekilde, boyaya bağlı nükleik asitlerden yayılan floresan, bakteri DNA içeriğini gösterir.
Antibiyotikle tedavi edilen hücreler, filamentli büyümeyi ve bölünmeden devam eden DNA replikasyonunu yansıtan artan saçılma ve floresans gösterir.
Bu, hücre bölünmesini inhibe eden antibiyotiklerin neden olduğu bakteri fizyolojisindeki değişiklikleri gösterir.
Taze ortamda 200 mikrolitre kültür numunesinin 10 ila eksi yedinciye kadar on kat seri seyreltme hazırlayın.
Her seyreltme arasında çok nazik
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin