Anaerobik Koşullar Altında Biyoyararlı Cıvayı Tespit Etmek için Bakteriyel Biyosensör Testi

Anaerobik bir odaya yerleştirilmiş şişeleri içeren bir tahlil kurulumuyla başlayın.

Her şişe, sodyum nitrat, cıva iyonları ve değişen konsantrasyonlarda magnezyum sülfat ile desteklenmiş ortam içerir.

Bileşenleri karıştırmak için kurulumu döndürün, ardından inkübe edin.

İnkübasyon sırasında, magnezyum sülfat, biyolojik olarak kullanılabilir olmayan cıva komplekslerinin oluşumunu teşvik ederek, serbest, biyolojik olarak kullanılabilir cıva iyonlarını konsantrasyona bağlı bir şekilde azaltır.

Ardından, indüklenmiş biyosensörleri, plazmit taşıyan genetiği değiştirilmiş bakterileri ekleyin ve karıştırın.

Plazmit, cıvaya duyarlı bir transkripsiyonel düzenleyici ve bir floresan raportör genine bağlı bir promotör içerir.

Anaerobik koşullar altında, bakteriler solunum için nitrat kullanır.

Serbest cıva iyonları hücrelere girer, transkripsiyonel düzenleyiciyi bağlar ve floresan genini aktive ederek floresan proteinler üretir.

Her şişedeki alikotları çok oyuklu bir plakaya aktarın.

Bir plaka okuyucu kullanarak floresan yoğunluğunu ölçün.

Artan magnezyum sülfat konsantrasyonları ile floresandaki azalma, biyosensörün biyolojik olarak kullanılabilir cıvadaki değişiklikleri tespit etme yeteneğini doğrular