JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 2:15 dk. • October 30th, 2025
Referans olarak uyuyan bakteri sporları ve floresan mikroküreler içeren bir slayt alın.
Sporlar, çimlenme proteinleri için kırmızı ve yeşil floresan raportörler taşır ve iç zar lipofilik bir boya kullanılarak boyanır.
Slaytı, yapılandırılmış bir aydınlatma mikroskobuna veya yağa daldırma objektifi ile donatılmış bir SIM'e monte edin.
Floresan mikroküreleri bulun ve görüntü bulanıklığını en aza indirmek için odağı ayarlayın.
Ardından, bakteri sporlarını bulmak için iletilen ışığı kullanın.
SIM moduna geçin ve floroforları uyarmak için sporları aydınlatın.
Spor derinliği boyunca yüksek çözünürlüklü floresan görüntüler elde edin.
Lipofilik boya lekeli iç zarda, çimlenme proteinleri belirgin kırmızı ve yeşil odaklar olarak görünür. Bu, bakteri sporları içindeki çimlenme proteinlerinin konumunun hassas bir şekilde haritalanmasını sağlar.
Numunelerin görüntülenmesi için, slaytı 100X yağ objektifi ile donatılmış yapılandırılmış bir aydınlatma mikroskobuna yerleştirin ve 100 nanometre floresan mikrokürelere odaklanın.
Görüntülerin bulanıklaşmasını en aza indirmek için simetrik bir nokta yayılma işlevi elde edilene kadar 100X objektif üzerindeki düzeltme halkasını ayarlayın ve yaklaşık 10 yuvarlak f
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin