İnsan Norovirüsünün Bakteri Kaynaklı Rekombinant P Alanı Proteinlerinin Saflaştırılması

JoVE Encyclopedia of Experiments

Mikrobiyoloji

0 görüntüleme • 2:01 dk • October 30th, 2025

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Gözenekli küresel jel boncuklarla dolu bir boyut dışlama kromatografi kolonu alın.

Kolonu, ayırma sırasında proteinlerin yapısal bütünlüğünü koruyan bir tamponla dengeleyin.

Rekombinant olarak eksprese edilmiş insan norovirüs P alanı proteinleri ve kalıntı protein safsızlıkları içeren saflaştırılmış bir bakteri özütü yükleyin.

Örneği sütundan geçirmek için arabelleği ekleyin.

Büyük kalıntı safsızlıklar gözeneklere giremez ve boncuklar arasındaki boşluklardan geçemez, önce dışarı çıkar.

UV absorbansı kullanarak elüsyonun izlenmesi. Küçük bir tepe noktası, kolondan çıkan safsızlıkları gösterir.

Buna karşılık, küçük P alanı proteinleri boncuk gözeneklerine girer, daha uzun bir yol kat eder ve daha sonra ayrışır. Absorbans zirvesindeki bir artış, P alanı proteinlerinin elüsyonunu gösterir.

Artık daha fazla analiz için hazır olan P alanı proteinlerini içeren ayrıştırılmış fraksiyonları toplayın.

Yüksek performanslı sıvı kromatografisi arıtma sisteminin pompalarını ve borularını yıkayın ve boyut dışlama kromatografisi kolonunu jel filtrasyon tamponu ile önceden dengeleyin. Konsantre numunenin hacmine bağlı olarak bir süper döngü veya döngü kullanarak P alanını dakikada bir mililitre akış hızında kolona enjekte edin. Enjeksiyon bittikten sonra akış hızını dakikada 2,5 mililitreye yükseltin.

Optik yoğunluk arttıkça ve P alanı kolondan çıktıkça, 1,5 mililitrelik kesirleri toplayın. P alanı genellikle bir dimer olarak ayrıştırılır.

09:35

Mavi Yerli PAGE ve Protein İlişkisi Profil Yöntemi ile Affinity Saf protein Kompleksler çözümleniyor

İlgili videolar

0 Görüntüler

10:08

Çok Sütunlu Plaka Adaptörü Kullanan Ekonomik ve Çok Yönlü Yüksek Verimli Protein Arıtma Sistemi

İlgili videolar

0 Görüntüler

07:19

Hızlı Protein Sıvı Kromatografi Sistemi Kullanılarak 6X His Etiketli Bir Proteinin Afinite Saflaştırılması

İlgili videolar

0 Görüntüler

15:16

Taqman By Çocuk Tabureler gelen Noroviruses tespiti ve Genogrouping Tek aşamalı RT-PCR

İlgili videolar

0 Görüntüler

13:47

Adenovirüs kaynaklı Sistemleri Yardımı ile verimli Rekombinant Parvovirus Üretim

İlgili videolar

0 Görüntüler

13:48

Bulaşıcı Mürin Norovirüs Ters Genetik Aracılı Kurtarma

İlgili videolar

0 Görüntüler

04:24

İnsan Norovirüs VLP'lerinin Bağırsak Bakterilerine Bağlanmasını Ölçmek İçin Bir Test

İlgili videolar

0 Görüntüler

10:46

İnsan Norovirüs çıkıntılı Domains üretimi içinde E. E. coli, X ışını Kristallografi için

İlgili videolar

0 Görüntüler

10:03

Yüzeyler İnsan Norovirus Tespiti sürüntü Örnekleme Yöntemi

İlgili videolar

0 Görüntüler

12:57

Viral kapsid yapısal bütünlük belirlenmesi için alternatif Vitro yöntemleri

İlgili videolar

0 Görüntüler

Son güncelleme: 22 Ağustos 2026