JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 3:00 dk. • October 30th, 2025
Tüberküloz lezyonlarından elde edilen ve özünde ilaca dayanıklı mikobakterileri barındıran nekrotik, lipit açısından zengin materyal olan kazeumun homojen bir süspansiyonunu alın.
Kazeum matrisi ile etkileşimini kolaylaştırmak için test ilacını homojenata ve girdaba ekleyin.
Taban plakasına yarı geçirgen bir zarla ayrılmış donör ve alıcı odalarını içeren hızlı bir denge diyalizi eki yerleştirin.
İlaç katkılı homojenatı donör odasına yükleyin ve alıcı odaya tampon ekleyin.
Plakayı kapatın ve döndürerek inkübe edin.
İnkübasyon sırasında, serbest ilaç zar boyunca yayılır ve her iki oda arasında dengeye ulaşır.
Dengeye ulaşıldığında, ilaç miktar tayini için matris koşullarını normalleştirmek için donör numuneyi tamponla ve alıcı numuneyi ilaçsız homojenatla seyreltin.
Son olarak, ilaç konsantrasyonunu ölçün ve bağlanmamış ilaç fraksiyonunu veya fu'yu hesaplayın.
Fu, kazeuma yayılmak ve ilaca toleranslı mikobakterilere ulaşmak için mevcut olan serbest ilacı yansıtır.
Hazırlanan test bileşiğinin 6.5 mikrolitresini 643.5 mikrolitre homojenata ekleyin. Beş mikromolar ve girdabın nihai konsantrasyonunu elde etmek için.
Daha sonra kırmızı parçaları taban plakasına yerleştirin. Her test için ekleri haz
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin