JoVE Encyclopedia of Experiments
Mikrobiyoloji
0 görüntüleme • 2:52 dk • October 30th, 2025
Metal indirgeyici bakteri süspansiyonunu metal iyonları içeren bir kültür ortamına aşılayarak başlayın.
Büyümeyi teşvik etmek ve metal iyonlarının alımını kolaylaştırmak için rotasyonla inkübe edin.
Metal iyonları hücrelere yayılır ve enzimatik olarak çözünmeyen metal oksitlere indirgenir.
Bu oksitler atılır ve bakteri zarının yakınında çekirdeklenir, burada hücrelerin dışında sert metal oksit mikrokapsülleri halinde kendiliğinden birleşirler.
İnkübasyondan sonra, bakterileri mikrokapsüllerden ayırmak için süspansiyonu ultrasonikleştirin.
Yoğun mikrokapsülleri pelet haline getirmek için karışımı santrifüjleyin ve süpernatanı atın.
Peleti suyla yıkayın, ardından ultrasonikleştirin. Bakterileri mikrokapsüllerden ayırmak için tekrar santrifüjleyin.
Ardından, yüzey gerilimini azaltmak için etanol ekleyin.
Kalan bakterileri yerinden çıkarmak ve mikrokapsülleri dağıtmak için tekrar ultrasonikasyon yapın.
Tekrar santrifüjleyin ve süpernatanı atın.
Etanol yıkamayı tekrarlayın.
Son olarak, saflaştırılmış mikrokapsüllerin kurumasını ve deformasyonunu önlemek için tüpleri kapatın.
Monoklonal bakterileri içeren kültürü alın ve sodyum tungstat ortamını içeren on adet 50 mililitrelik santrifüj tüpünün her birine 50 mikrolitre ekleyin.
On tüpü 37 santigrat derecelik bir inkübatörde 120 saat inkübe edin. İnkübasyonun ardından, tüplerin her birini bir ultrasonicator'a yerleştirin ve hücreleri bir saat boyunca 150 watt ile 20 kilohertz'de sonikleştirin.
Tüpleri santrifüjleyin ve ardından berrak sıvıyı bir pipetle çıkarın.
Ardından, su ekleyin ve ardından tüpleri bir kez daha sonikleştirin ve santrifüjleyin.
İkinci santrifüjlemeden sonra tüplerdeki berrak sıvıyı bir pipetle çıkarın.
Daha sonra 35 mililitre% 99.8 Etanol ekleyin ve numuneleri tekrar ultrasonikleştirin.
Mineralleri santrifüjleyerek, alkol ekleyerek ve numuneyi bir kez daha sonikleştirerek durulayın.
Daha sonra tüplerdeki berrak sıvıyı bir pipetle çıkarın ve numuneyi kurutmadan tüplerin kapağını hemen kapatın.